2024年4月3日发(作者：)

第

49

卷第

1

期

2021

年

2

月

陕西林业科技

Shaanxi

Forest

Science

and

Technology

Vol49

No1

Feb2021

“

吉塞拉

6

号

”

大樱桃砧木组培快繁技术研究

高小霞

，

张森

，

童耀宏

(陕西果业集团杨凌种苗科技有限公司

，

陕西杨凌

712100

)

摘

要

：

以吉塞拉

6

号茎段为材料进行大樱桃砧木组培快繁技术研究

，

结果表明

：

适宜吉塞拉

6

号的初

代培养基是改良

MS+6

—

BA

0.6mg

•

L

—

1

+IBA

0.1mg

•

L

—

1

,

诱导率为

92.

5%

;

继代培养基是改良

MS+6

—

BA

0.

8mg

•

L

—

1

+IBA

0.1mg

•

L

—

1

，增殖系数为

5.6

；

生根培养基是

1/2MS+NAA

1

m

g

•

L

-1

+IBA

0.

5mg

•

L

-1

，生根率为

98%

;

生根瓶苗移栽成活率在

95%

以上

。

关键词

：

吉塞拉

6

号；

矮化砧木

；

组织培养

中图分类号:

S662.

5

文献标志码:A

文章编号：

1001-2117(2021)01-0040-05

Tissue

Culture

and

Rapid

Propagation

of

Cherry

Rootstock

'Gisela

6'

GAO

Xiao-xia

,

ZHANG

Sen

,

TONG

Yao-hong

(Yangling

Seedling

Sei

—

tech

Company

,

Ltd

.

,

Shaanxi

Fruit

Industry

Group

,

Yangling

,

Shaanxi

712100

)

Abstract

:

Tissue

culture

with

'Gisela

6

'

as

propagation

material

was

conducted

.

The

result

showed

that

medium

suitable

for

primary

generation

of

'Gisela

6

'

was

MS

+

6

—

BA

0.

6

mg

・

L

—

1

+

IBA

0.

1

mg

・

L

—1

,

induction

rate

reaching

92.

5

%.

Medium

suitable

for

second

generation

of

'Gisela

6

'

was

MS+6

—

BA

0.

8

mg

・

L

—

1

+IBA

0.

1

mg

・

L

—

1

,

multiplication

coefficient

reaching

5.

6.

The

me

­

dium

for

rooting

was

1/2MS+NAA

1

mg

・

L

—1

+IBA

0.

5

mg

・

L

—

1

,

with

rooting

rate

at

98%.

The

bottled

rooting

seedlings

after

transplanted

could

survive

over

95

%.

Key

words

:

'Gisela

6'

；

dwarf

rootstock

；

tissue

culture

生产上利用樱桃矮化砧木进行密集栽培可以

取得较好成果

，

殷丽青等研究发现

，

吉塞拉

6

号丛

实现早挂果

、

早丰产

，达到经济效益最大化

。

目前

芽的继代培养基为改良

MS+6

—

BA

0.

5

mg

・

L

—

1

+TDZ

0.

01

m

g

・

L

—

1

+0.

1mg

・

L

—1

NAA

+

KT

0.

5mg

・

L

—

1

,

最佳生根培养基为

1/2MS

+

NAA

0.2mg

・

L

—

1

+IBA

1

mg

・

L

—

1

,

移栽前

吉塞拉系列砧木是推广大樱桃矮砧密植不可多得

的优良砧木

「

一

2

。

吉塞拉

6

号樱桃品种是通过杂

交选育而得

，

母本是欧洲酸樱桃

,

父本是灰毛叶樱

桃

,1988

年引入我国

，

经过多年的区域与生产试验

瓶苗需要进行锻炼

［

］。

冯社章等研究发现

，

吉塞

观察

，

与大多数甜樱桃嫁接亲和

，

具有矮化性

、

早果

拉

5

号的增殖培养基是

MS

+

6

—

BA

0.

3mg

・

L

—

1

+

NAA

0.

1

mg

・

L

—

1

,

生根最优培养基为

1/2MS+IBA

0.

3mg

・

L

-1

,

移栽前瓶苗需在自

性

、

早丰产

、

耐涝

、

抗病

、

土壤适应能力强等优点

3

,

但因是三倍体杂种不能种子繁殖

，

通常采取的根

孽

、

压条

、

扦插等繁殖方式存在繁殖速度慢

、生长不

然光环境下封闭锻炼并开瓶炼苗

［］

。

黄文江等研

究吉塞拉系列叶片再生体系发现

，

适宜的叶片再

一致,不能及时获得大量优质砧木苗满足生产需

要

，

限制了我国樱桃矮砧密植栽培的发展⑷

。

利用组培技术可快速大量繁殖生长一致的优

生培养基吉塞拉

6

号为

WPM

+

6

—

BA

5

mg

・

L

—

1

+

IBA

0.5mg

・

L

—

1

，

吉塞拉

5

号为

WPM

+

6

—

BA

7

mg

・

L

—

1

+

IBA

0.

3

mg

・

L

—

1

,

再生率

质吉塞拉砧木种苗

，

利于樱桃种苗规模化生产

，

同

时可为未来樱桃脱毒苗木繁育

、

种质资源保存提

供理论依据

。

目前我国樱桃砧木组织培养研究已

收稿日期

：

2020-10-21

最高分别为

100%

和

71.

9%

［

7

］

。

刘庆忠等研究吉

塞拉

5

、

6

、

7

号三种砧木组培快繁再生体系发现

,

作者简介

：

高小霞

(

1990 —

),

女

，

陕西西安人

，

硕士研究生

，

主要从事组培育苗技术研究

。

2021

年第

49

卷第

1

期

高小霞等

“

吉塞拉6

号

”

大樱桃砧木组培快繁技术研究

-

41

-

三者继代培养基均为

MS

+

ZT

0.

1mg

•

L

-1

+6

—

BA

0.

5mg

•

L

—

1

，

生根培养基均为

1/2MS

+

在

121

C

条件下高温高压灭菌

20min

。

在诱导与

增殖培养阶段的光照强度为

3

000

〜

4

000

Lux

,

IBA

0.3mg

•

L

-1

[]

。

杨俊霞等研究不同激素浓

温度为

（

24

士

2

）

C

，

光照强度为

3

000

〜

4

000

Lux,

光周期为白天

/

黑暗

=16

h/8h

。

在生根阶

度组合对大樱桃矮化砧木瓶苗扩繁系数影响发

现

，

吉塞拉

5

号

、

6

号与

7

号所用的激素浓度存在

差异

，

吉塞拉

5

号和

6

号在各自适宜的培养基上

增殖系数可分别达到

6.

4

和

5.

6

[]

。

李晓青等研

段除温度变为

（

22

士

2

）

C

外

，

其他条件相同

。

1.2.3

不同激素配比对外植体诱导分化的影响

试验

本试验所用激素为

IBA

和

6

—

BA,6

—

BA

究吉塞拉

5

号组织培养技术体系时发现

，

诱导培

养基与继代培养基相同

，

是

MS

+

6

—

BA

0.

5

g

浓度设置

3

个处理

，

分别为

0.

4

、

0.

6

和

0.

8mg

•

L

—

1

；

IBA

浓度设置

3

个处理

，

分别为

0.

04

、

0.

08

-

L

—

1

+

NAA

0.

2g

•

L

—

1

,

适宜生根培养基是

和

0.

1mg

・

L

-1

。

本试验共有

9

个处理

，

每个重

1/2MS+IBA0.5mg

•

L

-1

[

10

。

目前吉塞拉组培

研究在取得进展的同时,生产中存在的玻璃化

、

茎

尖坏死

、

生根率低等问题严重影响种苗生产规模

。

本研究以吉塞拉

6

号的当年生新梢为材料，

开展

组培快繁体系研究

，

以期为樱桃矮化砧木规模化

生产提供理论与实践依据

，

为推广大樱桃矮砧密

植模式奠定基础

。

1

材料与方法

1

1

材料

本研究的试验材料为吉塞拉

6

号

，

取材时间

是

4

月中旬至

5

月中旬

，

在连续

3

〜

5

d

晴天后取

材

，

选取生长健壮且无病虫害的半木质化枝条

，去

掉叶片但保留部分叶柄

，

将枝条剪成

2

〜

3

cm

的

长茎段待用

。

12

方法

1.2.1

无菌体系的建立

将处理好的茎段用洗

洁精清洗

2

遍后流水冲洗

2

h,

转移至无菌瓶中

,

75%

酒精处理

10

〜

15

s,

用无菌水清洗

3

遍

，

用质

量分数为

0.

1%

的氯化汞杀菌消毒

8

min,

无菌水

清洗

6

遍

，

消毒和清洗过程中不断震荡

，

枝条与溶

液充分接触以使消毒与清洗彻底

。

杀菌消毒完毕

后

，

用无菌滤纸吸干外植体表面水分

，

剥下叶柄

,

切除与氯化汞接触的剪口

，

将长茎段切成

1

〜

2

cm

带芽茎段

，

垂直接入培养基中

。

1.2.2

培养条件和培养基

初代培养基

、

继代培

养基采用的基本培养基是改良

MS

,

主要改变的

是增加四水硝酸钙

980

mg

•

L

—

1

和硫酸钾

780

mg

-

L

—

1

,

硝酸钾减半为

950

mg

-

L

—

1

,

将

EDTA

—

Fe

替换为

EDDHA

—

Fe,

含量为

150

m

g

-

L

-1

,

其余不变

。

两种培养基中添加蔗糖

30mg

-

L

—

1

，

琼脂

6

g

•

L

—

1

。

生根培养基采用

1/2MS

,

其中是大量减半

，

其余不变

，

添加蔗糖

20

g

-

L

—

1

,

琼脂

6g

•

L

-1

。

各培养基的

pH

均为

5.

8

,

复

3

次

，

每个处理

60

个外植体

（

每个重复

20

个外

植体

）

。

试验时将处理好的外植体分别接种至初

代培养基中

,

0

d

后统计数据

。

1.2.4

不同激素配比对吉塞拉

6

号瓶苗增殖生长

的影响

在增殖阶段使用的激素是

IBA

和

6

—

BA

，

6

—

BA

浓度设置

3

个处理

，

分别为

06

、

08

和

10

mg

-

L

—1

；

IBA

浓度处理也为

3

个处理

，

即

0.06

、

0.1

、

0.2

mg

-

L

-1

,

本试验共设

9

个处理

，

每

个处理重复

3

次

，

每个处理

60

株

（

每个重复

20

株

）

。

试验时切下外植体萌发的新芽

，

垂直接入继

代培养基中培养

，

培养

30

d

后转瓶并统计增殖

系数

。

1.2.5

不同生长素配比对吉塞拉

6

号组培苗生

根的影响

在生根培养基仅添加生长素

，

分别是

NAA

和

IBA,NAA

浓度设置

4

个处理

，

分别为

0

、

0.

6

、

0.

8

、

1.

0

mg

•

L

-1

；

IBA

浓度设置也是

4

个处

理

，

即

0

、

0.1

、

0.3

、

0.5

mg

•

L

—

1

，

本试验共设

16

个

处理

，

每个重复

3

次

，

每个重复

20

株

（

每个处理

60

株

）

。

试验时选取生长健壮一致的植株

，

切成

2

cm

的单芽植株

,

去掉基部叶片

,

接入各培养基中培养

,

培养

15

d

后计数生根情况并计算生根率

。

1.2.6

生根瓶苗移栽与驯化试验

瓶苗在生根

培养基中生长

15

d

后便可长出健壮的根系，

根数

4

〜

5

条

，

根长约

1

cm,

不经过闭瓶与开瓶炼苗

，

直

接进行移栽驯化

。

将生根植株从瓶内拿出

，洗掉

培养基

，

栽入穴盘中

，

基质配比为泥炭

：

椰糠

：

珍

珠岩

=12

:

5

:

3,

将穴盘转入驯化室的小拱棚内

进行驯化,保持小拱棚内温度在

24

〜

26

C

，

湿度

在

90%

以上

。

2

结果与分析

2.1

不同激素配比对外植体诱导分化的影响

外植体在初代培养基上生长

1

周后

，

各个培

养基上均有腋芽开始萌动

，

培养

4

周后统计各培

・

42

・

陕

西

林

业

科

技

养基上的腋芽萌发率

，

结果如表

1

所示

。

从表中

可以看出改良

MS

中添加

BA

0.

6

mg

・

L

—

1

和

IBA

0.

1

mg

・

L

—

1

是吉塞拉

6

号外植体启动和分

的新芽中出现玻璃化的现象

，

当

IBA

低于

0.

06

mg

・

L

-

1

时

，

新芽只有叶片长出

。

由此说明高浓

度的细胞分裂素会引起吉塞拉瓶苗的玻璃化

，生

化最适宜的初代培养基

，

诱导萌发率为

92.

1%

。

当

BA

的浓度超过

0.

6

mg

・

L

-1

时

，

外植体萌发

激素浓度

/(

mg

・

L

—

1

)

长素在吉塞拉

6

号外植体的诱导分化中起重要作

用

，

可促进茎枝的伸长

。

诱导萌发率

表

1

不同激素配比的外植体诱导分化状况

处理编号

—

—

BA

04

04

04

06

06

06

IBA

/

%

13.

3

外植体生长状态

节间短

，

叶片较大

节间短

，

叶片较大

节间短

，

叶片较大

长势较好

长势较好

长势较好

1

2

3

0.

04

0.

08

0.

10

0.

04

0.

08

0.

10

0.

04

0.

08

0.

10

33.

2

44.

4

53.

1

74.

6

92.

1

61.

4

4

5

6

7

08

08

08

长势较好

，

但部分有玻璃化

长势较好

，

但部分有玻璃化

长势较好

，

但部分有玻璃化

8

9

84.

9

92.

7

图

1

玻璃化的外植体

图

2

正常生长的外植体

2.2

不同继代培养基对瓶苗增殖生长的影响

系数随着

IBA

的浓度增加

，先升高后下降

，

植株

生长健壮

，

叶片颜色较深

；

IBA

浓度为

0.

1

mg

・

L

—

1

时

，

繁殖系数最高

，

为

3.62

。

以上结果说明芽

本试验中重点研究

BA

和

IBA

对吉塞拉

6

号

组培瓶苗增殖生长的影响

，

试验结果如表

2

所示

。

从表

2

中可以看出不同浓度

BA

和

IBA

组合对吉

塞拉

6

号的增殖生长影响存在明显差异

。

当

BA

的增殖数量和生长状态取决于

BA

和

IBA

的相

对比例

，

试验结果与植物生长调节激素的作用原

的浓度达到

1

mg

・

L-1

时

，

瓶苗出现了玻璃化现

象

；

当培养基中

BA

的浓度为

0.8

mg

・

L

-1

，

增殖

激素浓度

7(

mg

・

L

—

1

)

BA

06

06

06

IBA

理一致

。

在实际的组培苗规模化生产中

，

需根据

生产情况而选择不同的培养基

。

表

2

不同继代培养基的瓶苗增殖生长状况

处理编号

-

增殖系数

1.

91

1.

86

1.

70

瓶苗生长状态

1

2

3

0.

06

0.

10

0.

20

0.

06

0.

10

0.

20

0.

06

0.

10

0.

20

长势弱

，

不定芽较少

长势弱

，

不定芽较少

长势弱

，

不定芽少

长势强

，

不定芽较多

长势强

，

不定芽多

长势强

，

不定芽较多

长势较强

，

部分有玻璃化

4

5

6

08

08

08

10

10

10

2.

37

3.

62

2.

09

3.

08

3.

67

2.

90

7

8

9

长势强

，

部分有玻璃化

长势一般,少量有玻璃化

2021

年第

49

卷第

1期

高小霞等

“

吉塞拉6

号

”

大樱桃砧木组培快繁技术研究

•

43

•

图

3

玻璃化瓶苗

图

4

正常瓶苗

2.

3

不同生长素配比对瓶苗生根的影响

部膨大

,15d

后有乳白色根尖冒出

,

0

d

后根系长

约

1

〜

2

cm

。

两种激素组合诱导的植株在

7

d

后基

植物生长激素中生长素对瓶苗的生根起决定

性作用

，

本试验重点研究

IBA

和

NAA

对吉塞拉

6

号试管苗瓶内生根的影响,结果为

（

表

3

）

这

2

种激

素均可诱导吉塞拉

6

号试管苗生根

，

生根率以及根

系的情况并不相同

,

BA

诱导的根系细长,最高生

部膨大

,10

d

后根部有乳白色根尖冒出

，

15

d

后根

长约

1

〜

2

cm,

最高生根率为

9

&

6%

，

根系粗度适

中

。

综上所述将

2

种激素组合后的诱导比单个激

素诱导效果好

，

本试验较适宜激素配比为

NAA

1

mg

•

L

—

1

+IBA

0.

5

mg

•

L

—

1

。

根率为

25.9%

；

NAA

诱导的根系粗壮且短

，

最高生

根率为

35.1%

。

单个激素诱导的植株在

10

d

后基

表

3

不同生长素配比的瓶苗生根状况

处理编号

1

2

3

激素浓度

/（

mg

•

-

L

—

1

)

BA

00

00

00

00

05

05

05

05

10

10

10

10

IBA

—

平均生根率

/%

根系状态

无根系

00

01

00

87

13

9

基部膨大，

根系细长

03

05

4

25

9

12

2

5

6

7

00

01

基部膨大，

根系粗壮

24

0

03

05

35

0

53

7

8

9

10

00

01

35

1

68

8

83

8

98

6

11

12

03

05

图

5

IBA

诱导的根系

图

6

NAA

诱导的根系

图

7

激素组合诱导的根系

2.4

生根苗的移栽与驯化

炼苗

，

直接将生根植株洗去培养基

，

移栽至

50

孔

林木穴盘中

，

基质中包含泥炭

、

椰糠和珍珠岩

，

配

本研究中生根瓶苗的驯化移栽不用进行瓶内

・

44

・

陕

西

林

业

科

技

比为

12

：

5

：

3

(

v

：

v

：

v

),

1

周后根部有新根长

出

，

1

个月后移栽成活率达

95%

以上

，

此时可将穴

关

。

在实际生产中省略该步骤缩短了生产周期

,

节省生产成本至

70%

。

本研究利用

EDDHA

对

铁离子有特殊螯合功效

，

可提高铁盐利用率的功

盘苗转移至硬化室使其快速生长

，

加强水肥管理

及病虫害防治

，

3

个月后苗高便可长至

50

cm

以

上,可做嫁接的砧木苗用

。

用

[

11

]

,首次在吉塞拉砧木组织培养中使用

ED

­

DHA

—

螯合铁代替了

EDTA

螯合铁

，

促进了植

3

结论与讨论

本研究结论为适宜吉塞拉

6

号的初代培养基

株生长

，

使用方便

。

参

考

文

献

：

[

1

]

许纪龙

，

张本友

.

吉塞拉系列樱桃矮化砧组培快繁技术

是改良

MS+

6

—

BA

0.

6

mg

・

L

—

1

+IBA

0.

1

mg

・

L

—

1

，

诱导率为

92.

5%

；

继代培养基是改良

MS

+

6

—

BA

0.

8

mg

・

L

—

1

+IBA

0.

1mg

・

L^

,

增

殖系数为

5.6

；

生根培养基是

1/2MS+NAA

1

mg

・

L

—

1

+IBA

0.

5

mg

・

L

—

1

,

生根率为

98%

；生根

瓶苗移栽成活率在

95%

以上

。

MS

是吉

塞

拉

砧

木

组

织

培

养

中

的

常

用

培

养

基,但在我们实际生产中作为继代基本培养基

，容

易出现植株茎尖生长点坏死以及玻璃化现象

，

本

试验采用改良

MS

作为基本培养基后

，

成功解决

了该问题,具体原理需进一步探索研究

。

高浓度

BA

会引

起吉

塞拉瓶苗

玻璃化

，

这与

前人研究

结

果相同

[,]

。

我们发现瓶苗生根需使用低浓度

IBA

和高浓度

NAA

激素组合

，

与前人的报道并

不一致

B

79

-

】

。

]

这可能与组培苗的内源激素

、

生

长状况以及培养基的组分等不同有关

；

采用这

2

种激素配比缩短了生根周期

，

植株根系一致且较

短

，便于移栽且栽后生长快;生根瓶苗在移栽前进

行瓶内炼苗并不利于植株的生长

，去除该环节可

提高移栽成活率

，

植株长势更强

，

与前人报道不

同这可能与驯化环境与移栽后的管理有

[].

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