2024年4月13日发(作者：)

一 CTAB抽提缓冲液的配制：

要准备母液：1mol/L Tris-cl (PH8.0) ，0.5mol/L EDTA (PH8.0) 以及10%CTAB

母液配制方法

1、1M Tris-HCl 1L配制量

配制方法 称量121.1g Tris 置于1L烧杯中。

加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓盐酸

7.4 70ml

7.6 60ml

8.0 42ml

将溶液定容到1L。

高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却后加调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异

很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、 5M NaCl 配制量 1L

配制方法 称取292.2gNaCl置于1L 烧杯中，加入约800 ml的去离子水后搅拌溶解

加去离子水将溶液定容到1L 后，适量分成小份

高温高压灭菌后，4℃保存。

3、0.5M EDTA 配制量 1L

配制方法 称取186.1g Na2EDTA.2H2O，置于1L 烧杯中。

加入约800mL的去离子水，充分搅拌。

用NaOH调节pH值至8.0（约20g NaOH）（注意：pH值至8.0时EDTA

才能完全溶解）

加去离子水将溶液定容至1L。

适量分成小份后，高温高压灭菌。

室温保存。

CTAB缓冲液配制方法

CTAB缓冲液 1000mL 终浓度

Tris-HCl （1mol/L PH8.0） 100ml 100m mol/L

NaCl （5mol/L) 280ml 1.4mol/L

EDTA （0.5mol/L PH8.0） 40ml 20m mol/L

CTAB 20g 2% (w/v)

加去离子水将溶液定容至1L。

高温高压灭菌后，室温保存。

CTAB抽提缓冲液室温保持，用前加0.3mg/ml蛋白酶K，1%（v/v）β-琉基乙醇，

1%PVP

PVP 10g

β-巯基乙醇 10ml

(PVP（化学名称：聚乙烯吡咯烷酮）是一种水溶性的乙烯基吡咯烷酮线性均聚物，主

要成份为 N-乙烯吡咯烷酮。具有吸湿性易流动的粉末，无臭或微臭，不溶于水、碱、酸

及常用有机溶剂，具有很强的膨胀性能和与多类物质的络合能力。可做粘合剂)

二 20%SDS的配制

将20g SDS溶解于60mL 左右双蒸水，定容至100mL.

20% 的SDS属于高浓度，在低温下难溶解，所以溶解时可以水浴加热至 60或65摄

氏度左右，助溶。也可以使用超声波加速溶解，但效果不太好。还是水浴加热助溶比较好。

然后灭菌。

三 6mol/L的氯化钠溶液