2024年3月17日发(作者：红米note7拆机视频教程)

MMP-12及其抑制因子TIMP-1在基底细胞癌和鳞状细胞癌

患者皮损中的表达

司海鹏;高丽丽;王剑蓉

【摘 要】目的:明确基质金属蛋白酶-12(MMP-12)及其抑制因子-1(TIMP-1)与基

底细胞癌(BCC)和鳞状细胞癌(SCC)的相关性.方法:通过免疫组化法检测MMP-12

及TIMP-1在20例正常皮肤组织(NC)和31例基底细胞癌(BCC)、25例皮肤鳞状

细胞癌患者(SCC)皮损中的表达.结果:MMP-12、TIMP-1在BCC和SCC中均呈弥

漫性阳性表达.MMP-12在BCC和SCC患者中表达阳性率分别为45.2％和80％,

高于正常组的5％(P<0.05),TIMP-1在BCC和SCC患者中表达阳性率分别为67.7％

和60％,低于正常组的90％(P<0.05).结论:MMP-12、TIMP-1蛋白可能在BCC和

SCC发病中发挥重要作用.

【期刊名称】《中国麻风皮肤病杂志》

【年(卷),期】2018(034)008

【总页数】4页(P457-459,463)

【关键词】基底细胞癌;皮肤鳞状细胞癌;基质金属蛋白酶-12;基质金属蛋白酶组织

抑制因子-1

【作 者】司海鹏;高丽丽;王剑蓉

【作者单位】南京中医药大学附属医院,南京,210029;南京中医药大学附属医院,南

京,210029;南京中医药大学附属医院,南京,210029

【正文语种】中 文

基底细胞癌(basal cell carcinoma, BCC)和皮肤鳞状细胞癌(squamous cell

carcinoma，SCC)统称为非黑色素瘤皮肤癌(non-melanomatous skin cancer,

NMSC)，两者皆起源于表皮角质形成细胞，具有较高的发生率，给患者带来身体

和精神的双重压力[1]。基质金属蛋白酶12(matrix metalloproteinase-12，

MMP-12，也称巨噬细胞金属弹力酶)能够广泛降解如IV型胶原、纤连蛋白、层黏

连蛋白、玻连蛋白、硫酸软骨素和肝素钠等细胞外基质，据报道，MMP-12具有

抗肿瘤发生和促肿瘤发生的双重效应[2,3]。基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue

inhibitor of metalloproteinase, TIMP)可以特异性地结合MMPs进而发挥调节

作用，是MMP-12主要的抑制剂。多数研究表明除了乳腺癌、结肠癌等常见肿瘤

[4,5]，在皮肤恶性黑色素瘤及皮肤鳞状细胞癌中[6-8]MMP表达增高并促进肿瘤

进展，TIMP对MMP具有较强抑制作用，而在NMSC中二者的表达及意义报道

较少，本研究应用免疫组化法检测正常皮肤、BCC患者皮肤及SCC患者皮肤组织

中MMP-12及TIMP-1的表达，探讨其与NMSC发生的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年1月至2017年12月间我院门诊及住院患者的基底细

胞癌及皮肤鳞状细胞癌手术切除标本共56例，均经组织病理证实。其中BCC患

者31例，年龄36～83岁，平均61.25岁，男17例，女14例；头面部24例，

躯干部7例。SCC患者25例，年龄29～82岁，平均61.2岁，男15例，女10

例；其中头颈部10例，外生殖器8例，四肢5 例，躯干2例；按分化程度分为高

分化组10例，中分化组8例，低分化组7例。另取我院皮肤科及外科手术切除正

常皮肤20例作为对照。

1.2 试剂 鼠抗人多克隆抗体MMP-12、鼠抗人单克隆抗体TIMP-1购自广州莱德

尔公司。枸橼酸抗原修复液、DAB显色液均购自武汉博士德。

1.3 免疫组化 每个组织块进行3 μm连续切片，经脱蜡、H2O2(过氧化氢)封闭、

热修复后PBS洗涤3次，血清封闭，滴加一抗，一抗37℃孵育1 h后，PBS清洗

3次，滴加二抗试剂，最后经DAB显色、苏木素复染，用已有阳性片子作阳性对

照，使用不加一抗片子作为阴性对照。结果判断标准：胞质内出现黄色颗粒状物质

判为阳性，并按着色强弱分级：无着色为0分，浅黄色划为1分，深黄色为2分，

棕褐色为3分。随机选取5个视野，计算阳性细胞所占的百分比均值：无阳性细

胞为0分，阳性细胞1%～10%为1分，11%～50%为2分，51%～75%为3分，

75%以上为4分。将上述两项评分标准相加可得表达强度积分：<2分为阴性(-)，

≥2分且<3分为弱阳性(+)，≥3分且<4分为阳性(++)，≥4分为强阳性(+++)。

1.4 统计学方法 应用SPSS 19.0软件对结果进行数据分析，计量资料和计数资料

分别采用方差分析和卡方检验，P<0.05为有显著性差异。

2 结果

2.1 MMP-12与TIMP-1蛋白表达情况 MMP-12在正常对照表皮中几乎不表达，

在真皮区域的成纤维样细胞呈弱阳性表达。31例BCC中MMP-12阳性表达为14

例(45.2%)，呈弱阳性弥散于癌巢。25例SCC患者中阳性表达20例(80%)，阳性

细胞在癌巢内表达，阳性较强者主要位于癌巢中心，癌巢增殖区域反而着色略淡，

也可观察到癌巢周围间质中部分巨噬细胞、成纤维样细胞有少量阳性表达。TIMP-

1在正常对照表皮中呈现大量阳性表达，31例BCC患者中有21例呈阳性表达

(67.7%)。25例SCC患者中TIMP-1阳性表达15例(60%)，高分化的SCC可见

癌巢区域大片的表达，而在低分化者中表达减弱。BCC、SCC与正常组比较，均

具有统计学差异。见表1及图1。

表1 MMP-12与TIMP-1在正常组织、BCC及SCC中的阳性表达组别例数

MMP-12TIMP-1NC201(5%)18(90%)BCC3114(45.2%)*21(67.7%)*SCC25

20(80%)*15(60%)*

注：*与正常组比较，P<0.05

2.2 不同分化程度SCC中MMP-12与TIMP表达情况 MMP-12蛋白表达水平随

着肿瘤分级的增高而增高，即在低分化鳞癌的表达明显高于高分化组，而TIMP-1

蛋白表达与之相反，在高分化鳞癌的表达明显高于低分化，比较有统计学差异

(P<0.05)。见表2。

图1 MMP-12与TIMP-1在正常组织、BCC及SCC病理组织中的表达情况(免疫

组化，×200)a：正常组织MMP-12阴性表达； b：BCC组织MMP-12弱阳性表

达； c：SCC组织MMP-12阳性表达； d：正常组织TIMP-1阳性表达； e：

BCC组织TIMP-1阳性表达； f：SCC组织TIMP-1阳性表达

表2 SCC不同分化程度中MMP-12与TIMP-1表达情况临床病理特征分类例数

MMP-12 TIMP-1 -/+++/+++-/+++/+++高103(30%)7(70%)3(30%)7(70%)

分化程度中82(25%)6(75%)3(37.5%)5(62.5%)低

70(0)7(100%)*4(57.1%)3(42.9%)*

注：与对应分类比较，*P<0.05

3 讨论

皮肤癌是迄今造成最普遍危害的癌症之一，根据其发生的细胞和临床表现来命名，

最常见的三种类型是基底细胞癌、鳞状细胞癌及恶性黑色素瘤。基底细胞癌、鳞状

细胞癌都来自表皮的角质形成细胞，每年全球非黑色素瘤皮肤癌(NMSC)发生两百

多万例，据估算，在未来30年发生率可能增加一倍。BCC的发生率占NMSC发

生率的80%～85%，生长缓慢，极少转移到其他器官[9]。SCC发生占NMSC的

15%～20%，侵袭性强，如未得到及时治疗则会侵犯周围正常的皮肤、皮下组织

及肌肉，引起较为严重的损害[10]，NMSC即使未发生转移也会造成明显的毁损，

造成生理、心理及经济负担，降低人们的生活质量[11]。这二种肿瘤均为老年人多

发，BCC女性患者较多，SCC男性患者略多[12]，最常见于头面部等曝光部位，

目前，NMSC治疗首选手术切除，但是易复发，SCC和BCC发生浸润转移及复发

的一个主要原因是基底膜完整性被破坏。

MMPs主要由单核巨噬细胞、中性粒细胞等细胞合成分泌，可降解细胞外基质的

多种成分和基底膜。研究表明，在肿瘤细胞的恶性表型和侵袭转移表型中MMPs

为高表达状态[13]。在乳腺癌、结肠癌、前列腺癌和口腔癌等也发现MMP-2及

MMP-9表达上调[14]。在肿瘤转移过程中，MMPs可以通过破坏局部组织的正常

生理结构，促进肿瘤生长和发展，促进肿瘤细胞各类生长因子的分泌,加快肿瘤细

胞的增殖。此外MMPs还可协助肿瘤细胞发生免疫逃逸[15]及促进肿瘤的新生血

管迅速形成[16]。MMP-12是MMPs家族中的一员，又称巨噬细胞金属弹性酶

(HME)，一方面它在分解纤溶酶原和V型胶原等细胞外基质的过程中，可促进产

生抑制血管生成的血管抑素和内抑素，从而抑制肿瘤的生长和侵袭[2]；另一方面，

在分解胶原和纤维蛋白等细胞外基质过程中，能诱导MMP-2及MMP-9的表达，

促进血管生成及促进肿瘤侵袭和转移[3]，所以MMP-12在肿瘤进展上的作用是双

向的。在皮肤癌中，相对正常皮肤，MMP-12在恶性黑色素瘤中表达增加，与其

侵袭性相关[17]。在SCC和BCC的研究中发现，MMP-12表达在肿瘤细胞和巨

噬细胞上，SCC中MMP-12的表达明显高于BCC，提示MMP-12的表达水平在

两者中存在差异，与其侵袭性有关。本实验中MMP-12表达的免疫组化结果与前

人实验[18]类似，BCC中的MMP-12阳性表达45.2%，SCC患者中阳性表达

80%，在SCC及BCC具有明显差异；而且MMP-12蛋白表达水平随着肿瘤分级

的增高而增高，即在低分化鳞癌的表达明显高于高分化组，表明了MMP-12与肿

瘤的转移能力关联密切。

TIMPs由成纤维细胞、角质形成细胞以及成骨细胞等分泌产生。TIMPs对MMPs

活性的抑制作用是控制MMPs活性的重要机理，TIMPs主要通过控制肿瘤的生长

与增殖、侵袭与转移、血管生成及细胞凋亡来发挥抑制肿瘤功效。在增殖的抑制及

对凋亡的促进方面，报道有所矛盾[14]。多项研究表明在皮肤癌、肺癌、大肠癌等

恶性肿瘤中，TIMP-1阳性表达率明显增高，其过度表达则预后不良的报道较多

[19]。而在头颈部鳞状细胞癌中经半定量RT-PCR法检测，发现在肿瘤组织中

TIMP-1表达下降[6，20]。本实验中TIMP-1阳性表达在BCC患者中有67.7%，

在SCC患者中有60%，以上结果表明在SCC中TIMP-1的表达较BCC少，而且

在高分化鳞癌的表达明显高于低分化组，比较有统计学差异，表明随着侵袭度的增

加，TIMP-1表达逐渐减少。

综上所述，本文就MMP-12、TIMP-1 在NMSC中表达做了初步的研究。其中

MMP-12及其抑制剂与SCC的组织分化程度和浸润转移密切相关，可以作为皮肤

SCC早期转移和侵袭性的一个指标，而在BCC中其机理还有待探索，可能与其他

MMPs的表达具有关联性。

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