2024年3月31日发(作者：)

几种细胞混合培养特点及应用

高征

摘 要：混合细胞培养又称协同培养(coculture)，系指两种或多种细胞在同一个培养容

器内，同样的培养条件(如培养液、培养温度等)下进行混合培养。根据实验不同的要求，

可采用不同种类的敏感细胞，以细胞合适的比例进行混合培养。本文介绍了几种常见的细

胞混合培养方法及其特点。

关键字：混合细胞；培养；淋巴细胞；兔成骨细胞；兔骨髓基质干细胞；肝癌细胞；

大鼠皮层神经元细胞；大鼠胶质细胞；表皮细胞；纤维细胞；U937；鼻咽癌细胞

混合细胞培养又称协同培养(coculture)，系指两种或多种细胞在同一个培养容器内，

同样的培养条件(如培养液、培养温度等)下进行混合培养。根据实验不同的要求，可采用

不同种类的敏感细胞，以细胞合适的比例进行混合培养。

1.混合淋巴细胞培养

1.1混合淋巴细胞培养定义

混合淋巴细胞培养（mixed lymphocyte culture）是指同种异体的淋巴细胞在体外共

同培养的现象。若一方(通常为供者)淋巴细胞经灭活处理，则称“单向混合淋巴细胞培养

(one-way mixed lymphocyte culture)”。

两个无关个体功能正常的淋巴细胞在体外混合培养时，由于HLAⅡ类抗原中D和DP

抗原不同，可相互刺激对方的T细胞发生增殖，此为双向混合淋巴细胞培养(two way

MLC)。若将其中一方的淋巴细胞先用丝裂霉素C(mytomycine C)处理或射线照射使之细

胞中DNA失去复制能力，但仍能刺激另一方淋巴细胞发生转化，称为单向混合淋巴细胞

培养(one way MLC)。

1.2混合淋巴细胞培养用途

混合淋巴细胞培养(MLC)或称混合淋巴细胞反应(MLR) 常用于器官移植前的组织配

型，以测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容的程度。由于MLC中淋巴细胞

接受同种异型抗原的刺激而发生活化、增殖，产生种类众多的细胞因子，促进NK、LAK

和CTL等杀伤细胞的分化，因此又是免疫调节研究中常用的实验模型。

两个个体间HLA抗原差异程度越大，反应越强烈，可通过细胞数量、形态检查或

3H-TdR掺入率检测反应细胞的增殖水平。如用经照射的、已知D位点抗原的纯合子分型

细胞(Homozygous typing cell，HTC)作为刺激细胞，则可检测待检者的D位点抗原型别。

若待检者抗原与标准HLA-D抗原相同，MLC不发生增殖，此为HLA-D抗原阴性分型法。

EB病毒转化的B淋巴母细胞表达高水平的HLAⅡ类抗原，常作为单向混合淋巴细胞培养

中的刺激细胞。

2.混合细胞培养在病毒学和肿瘤学研究中的应用

2.1混合细胞培养的具体应用方法

根据实验不同的要求，可采用不同种类的敏感细胞，以细胞合适的比例进行棍合培养。

待细胞形成致密的单层后接种病毒，研究蚀斑形成的条件，或以受染病毒的病人或尸解组