细胞工程实验--培养基成分表

细胞工程实验--培养基成分表


2024年1月4日发(作者:三星gtn7000)

附表1 几种常见的培养基配方

培 养 基(单位:MG /L)

化学成分

NH4NO3

KNO3

CaCl2·2H2O

MgSO4.7H2O

NH4H2PO4

KH2PO4

(NH4)2SO4

NaH2PO4.H2O

Ca(NO3)2.4H2O

Ca3(PO4)2

KCl

FeSO4.7H2O

Na2-EDTA

Fe2(SO4)3

MnSO4.4H2O

ZnNa2EDTA

ZnSO4.7H2O

H3BO3

KI

Na2MoO4.2H2O

CuSO4.5H2O

CoCl2.6H2O

MoO3

甘氨酸

盐酸硫胺素

盐酸吡哆素

D-泛酸钙

生物素

叶酸

烟 酸

肌 醇

蔗 糖

pH

MS[1]

1650

1900

440

370

170

27.8

37.3

22.3

8.6

6.23

0.83

0.25

0.025

0.025

2

0.1

0.5

0.5

100

30000

5.7

150

150

27.8

37.3

10

2.0

3.0

0.75

0.25

0.025

0.025

10.0

1.0

1.0

100

20000

5.0

B5[2]

2500

150

250

N6[2]

2830

166

185

400

463

27.8

37.3

4.4

1.5

1.6

0.8

2

1.0

0.5

0.5

50000

5.8

H[3]

720

950

166

185

68

27.8

37.3

25

10.0

10.0

0.25

0.025

2

0.5

0.5

0.05

0.5

5.0

100

20000

5.5

SH[2]

2500

200

400

300

15

20.0

10.0

1.0

5.0

1.0

0.1

0.2

0.1

5.0

0.5

5.0

1000

30000

5.8

ER[1]

1200

1900

440

370

340

27.8

37.3

2.23

15.0

0.63

0.025

0.025

0.025

2

0.5

0.5

0.5

40000

5.8

Miller[3]

1000

1000

35

300

347

65

4.4

1.5

1.6

0.8

2

0.1

0.1

0.5

30000

6.0

Morel[4]

125

125

500

125

1.0

10

0.01

1.0

0.1

20000

6.0

White[4]

80

737

288

65

2.5

6.65

2.67

1.5

0.75

0.001

0.001

3

0.1

0.1

0.3

100

20000

5.6

说明: [1]无机盐含量高,微量元素种类齐全,适用范围广;[2]硝酸钾含量高,适合于愈伤组织和细胞悬浮培养;[3] 中等无机盐含量;[4]低无机盐含量,一般作生根培养。固体培养基应加入琼脂0.6-0.7%。

表2 用于离体叶肉细胞培养的培养基配方

成分

KNO3

KCl

NH4NO3

NaNO3

MgSO4.7H2O

CaCl2

CaCl2·6H2O

KH2PO4

NaH2PO4.2H2O

NH4Cl

MnSO4.4H2O

Mn Cl2.4H2O

H3BO3

ZnSO4.4H2O

ZnCl2

Na2MoO4.2H2O

CuSO4.5H2O

CuCl2.2H2O

CoCl2

FeSO4.7H2O

FeCl3.7H2O

Na2-EDTA

乙烯二腈四乙酸二钠

甘氨酸

烟酸

盐酸硫胺素

盐酸吡哆素

生物素

叶酸

水解酪蛋白

肌醇

BAP

激动素

2,4-D

蔗 糖

pH

含量(mg/L)

Rossini(1972)

950

725

187

169

69

12.5

5

5

0.125

0.0125

13.9

18.6

2

5

0.5

0.5

0.05

0.5

100

0.1

1

10000

5.0

Rossini(1972)

750

600

250

112

141

5.35

0.036

0.056

0.15

0.025

0.054

0.02

0.5

0.8

400

0.1

1

20000

1

烟草细胞悬浮培养基

(引自Reynolds和Murashige,1979)

无机盐

盐酸硫胺素

盐酸吡哆醇

盐酸

肌醇

水解酪蛋白

2,4-D

激动素

蔗糖

pH

同MS培养基

10

10

5

100

1000

2

0.1

30000

5.7

表3 适于低密度下培养原生质体的KM8p培养基(采用过滤灭菌)

成分

NH4NO3

KNO3

CaCl2·2H2O

MgSO4.7H2O

KH2PO4

KCl

NaFe. EDTA

葡萄糖

蔗糖

果糖

核糖

木糖

有机酸

丙酮酸钠

柠檬酸

维生素

肌醇

尼克酰胺

盐酸硫胺素

盐酸吡哆素

D –泛酸钙

叶酸

p-对氨基苯甲酸

激素

2,4-D

玉米素

NAA

水解酪蛋白

椰子汁

含量(mg/L)

600

1900

600

300

170

300

28

68400

125

125

125

125

5

10

100

1

1

10

0.5

0.2

0.01

125

10ml/L

成分

KI

H3BO3

MnSO4.H2O

ZnSO4.7H2O

Na2MoO4.2H2O

CuSO4.5H2O

CoCl2.6H2O

甘露糖

鼠李糖

纤维二糖

山梨醇

甘露醇

苹果酸

延胡索酸

生物素

氯化胆碱

核黄素

抗坏血酸

微生物A

维生素D3

维生素 B12

大豆+小麦

1

0.1

含量(mg/L)

0.75

3.00

10.00

2.00

0.25

0.025

0.025

125

125

125

125

125

10

10

0.005

0.5

0.1

1

0.005

0.005

0.01

大豆+ 豌豆或粉蓝烟草

0.2

0.5

1

引自Kao和Michayluk,1975及Kao和Wetter,1977。

2

表4 原生质体培养的几种常用培养基 单位: mg/L

成 份

NT DPD D2a KM8P V-KM

无机盐

KNO3 950 1480 1480 1900 1480

NH4NO3 825 270 270 600 1444

CaCl2·2H2O 220 570 900 600 735

MgSO4·7H2O 1233 340 900 300 934

KH2PO4 680 80 80 170 68

KCl - - - 300 -

MnSO4·H2O - - - 10.0 10.0

MnSO4·4H2O 22.3 7.2 5.0 - -

KI 0.83 0.25 0.25 0.75 0.75

CoCl2·6H2O - 0.01 0.01 0.025 0.025

CoSO4·7H2O 0.03 - - - -

ZnSO4·7H2O 8.6 1.5 1.5 2.0 2.0

CuSO4·5H2O 0.025 0.015 0.015 0.025 0.025

H3BO3 6.2 2.0 2.0 3.0 3.0

Na2MoO4·2H2O 0.25 0.1 0.1 0.25 0.25

Na2-EDTA 37.3 37.3 37.3 - 37.3

FeSO4·7H2O 27.8 27.8 27.8 - 27.8

Seqestrene 330 Fe - - - 28 -

糖类和糖醇

葡萄糖 - - 0.4mol/L 68,400 108,900

蔗糖 10,000 17,100 17100 250 250

果糖 - - - 250 250

核糖 - - - 250 250

木糖 - - - 250 250

甘露醇 127,520 55,000 - 250 250

鼠李糖 - - - 250 250

纤维二糖 - - - 250 250

山梨醇 - - - 250 250

甘露糖 - - - - 250

维生素和有机酸

肌醇 100 100 100 100 100

盐酸硫胺素VB1 1 4.0 4.0 1 1

盐酸吡哆醇VB6 - 0.7 0.7 1 -

烟酸 - 4.0 4.0 - 1

烟酰胺 - - - 1 -

抗坏血酸 - - - 2 2

氯化胆碱 - - - 1 1

泛酸钙 - - - 1 1

叶酸 - 0.4 0.4 0.4 0.4

核黄素 - - - 0.2 -

3

对氨基苯甲酸

生物素

维生素A

维生素D3

维生素B12

柠檬酸

苹果酸

延胡羧酸

丙酮酸钠

氨基乙酸

其他有机添加物

椰子乳

水解 酪蛋白

生长调节剂

2,4-D

6-BA

NAA

IAA

2,4,5,-T

玉米素

pH

0.04

1.4

1.3

0.4

5.8

0.04

1.4

5%

0.6

1.5

0.5

5.7

0.02

0.01

0.01

0.01

0.02

40

40

40

20

2

20(ml)

250

0.2

1.0

0.5

5.6

0.02

0.01

0.01

0.01

40

40

40

20

20(ml)

250

0.4

1.5

1.0

5.7

1.0

3.0

5.8

注: NT: Nagata & Takebe,1971; DPD: Durand 等,1973; D2a: 李向辉等,1981; KMP8: kao & Michayluk,1975; V-KM: Binding & Nehl,1979。

细胞筛孔径(μm)与目换算表

20

30

40

50

60

80

100

孔径

900

600

450

355

280

180

154

120

140

150

160

180

200

250

孔径

125

105

100

98

90

76

61

280

300

320

325

350

360

400

孔径

55

50

45

43

41

40

38.5

500

600

700

800

孔径

30

20

15

10

目(mesh)即为

每英寸的孔数

4

植物组织培养常用缩略语

ADE adenine

KT kinetin(6-Furfurylaminopurine)

BA 6-benzyladenine

BAP 6-benzylaminopurine

ZT zeatin

2-iP 6-(γ,γ-dimethylallylamino)purine

或2-isopentenyladenine

2,4-D 2,4-dichlorophenoxyacetic acid

NAA α-naphthaleneacetic acid

IAA indol-3-acetic acid

IBA indol-3-butyric acid

CCC chlorocholine chloride

CH casein hydrolysate

LH lactalbumin hydrolysate

CM coconut milk

ME malt extract

YE yeast extract

EDTA ethylenediaminetetraacetate

GA3 gibberellic acid

DMSO dimethylsulfoxide

PEG polyethylene glycol

PVP polyvinylpyrrolidone

AC activated carbon

UV ultraviolet (light)

lx lux

mol mole

W/V weight/volume (concentration)

腺嘌呤

激动素(6-糖氨基嘌呤)

6-苄基腺嘌呤

6-苄氨基嘌呤

玉米素

二甲基丙烯嘌呤

2,4-二氯苯氧乙酸

萘乙酸

吲哚乙酸

吲哚丁酸

矮壮素

水解酪蛋白

水解乳蛋白

椰子汁

麦芽浸出物

酵母浸提物

乙二胺四乙酸

赤霉素

二甲基亚砜

聚乙二醇

聚乙烯吡咯烷酮

活性炭

紫外光

勒克司(照度单位)

摩尔

重量/容积(浓度)

5


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