2024年1月4日发(作者:三星gtn7000)
附表1 几种常见的培养基配方
培 养 基(单位:MG /L)
化学成分
NH4NO3
KNO3
CaCl2·2H2O
MgSO4.7H2O
NH4H2PO4
KH2PO4
(NH4)2SO4
NaH2PO4.H2O
Ca(NO3)2.4H2O
Ca3(PO4)2
KCl
FeSO4.7H2O
Na2-EDTA
Fe2(SO4)3
MnSO4.4H2O
ZnNa2EDTA
ZnSO4.7H2O
H3BO3
KI
Na2MoO4.2H2O
CuSO4.5H2O
CoCl2.6H2O
MoO3
甘氨酸
盐酸硫胺素
盐酸吡哆素
D-泛酸钙
生物素
叶酸
烟 酸
肌 醇
蔗 糖
pH
MS[1]
1650
1900
440
370
170
27.8
37.3
22.3
8.6
6.23
0.83
0.25
0.025
0.025
2
0.1
0.5
0.5
100
30000
5.7
150
150
27.8
37.3
10
2.0
3.0
0.75
0.25
0.025
0.025
10.0
1.0
1.0
100
20000
5.0
B5[2]
2500
150
250
N6[2]
2830
166
185
400
463
27.8
37.3
4.4
1.5
1.6
0.8
2
1.0
0.5
0.5
50000
5.8
H[3]
720
950
166
185
68
27.8
37.3
25
10.0
10.0
0.25
0.025
2
0.5
0.5
0.05
0.5
5.0
100
20000
5.5
SH[2]
2500
200
400
300
15
20.0
10.0
1.0
5.0
1.0
0.1
0.2
0.1
5.0
0.5
5.0
1000
30000
5.8
ER[1]
1200
1900
440
370
340
27.8
37.3
2.23
15.0
0.63
0.025
0.025
0.025
2
0.5
0.5
0.5
40000
5.8
Miller[3]
1000
1000
35
300
347
65
4.4
1.5
1.6
0.8
2
0.1
0.1
0.5
30000
6.0
Morel[4]
125
125
500
125
1.0
10
0.01
1.0
0.1
20000
6.0
White[4]
80
737
288
65
2.5
6.65
2.67
1.5
0.75
0.001
0.001
3
0.1
0.1
0.3
100
20000
5.6
说明: [1]无机盐含量高,微量元素种类齐全,适用范围广;[2]硝酸钾含量高,适合于愈伤组织和细胞悬浮培养;[3] 中等无机盐含量;[4]低无机盐含量,一般作生根培养。固体培养基应加入琼脂0.6-0.7%。
表2 用于离体叶肉细胞培养的培养基配方
成分
KNO3
KCl
NH4NO3
NaNO3
MgSO4.7H2O
CaCl2
CaCl2·6H2O
KH2PO4
NaH2PO4.2H2O
NH4Cl
MnSO4.4H2O
Mn Cl2.4H2O
H3BO3
ZnSO4.4H2O
ZnCl2
Na2MoO4.2H2O
CuSO4.5H2O
CuCl2.2H2O
CoCl2
FeSO4.7H2O
FeCl3.7H2O
Na2-EDTA
乙烯二腈四乙酸二钠
甘氨酸
烟酸
盐酸硫胺素
盐酸吡哆素
生物素
叶酸
水解酪蛋白
肌醇
BAP
激动素
2,4-D
蔗 糖
pH
含量(mg/L)
Rossini(1972)
950
725
187
169
69
12.5
5
5
0.125
0.0125
13.9
18.6
2
5
0.5
0.5
0.05
0.5
100
0.1
1
10000
5.0
Rossini(1972)
750
600
250
112
141
5.35
0.036
0.056
0.15
0.025
0.054
0.02
0.5
0.8
400
0.1
1
20000
1
烟草细胞悬浮培养基
(引自Reynolds和Murashige,1979)
无机盐
盐酸硫胺素
盐酸吡哆醇
盐酸
肌醇
水解酪蛋白
2,4-D
激动素
蔗糖
pH
同MS培养基
10
10
5
100
1000
2
0.1
30000
5.7
表3 适于低密度下培养原生质体的KM8p培养基(采用过滤灭菌)
成分
NH4NO3
KNO3
CaCl2·2H2O
MgSO4.7H2O
KH2PO4
KCl
NaFe. EDTA
糖
葡萄糖
蔗糖
果糖
核糖
木糖
有机酸
丙酮酸钠
柠檬酸
维生素
肌醇
尼克酰胺
盐酸硫胺素
盐酸吡哆素
D –泛酸钙
叶酸
p-对氨基苯甲酸
激素
2,4-D
玉米素
NAA
水解酪蛋白
椰子汁
含量(mg/L)
600
1900
600
300
170
300
28
68400
125
125
125
125
5
10
100
1
1
10
0.5
0.2
0.01
125
10ml/L
成分
KI
H3BO3
MnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
Na2MoO4.2H2O
CuSO4.5H2O
CoCl2.6H2O
甘露糖
鼠李糖
纤维二糖
山梨醇
甘露醇
苹果酸
延胡索酸
生物素
氯化胆碱
核黄素
抗坏血酸
微生物A
维生素D3
维生素 B12
大豆+小麦
1
0.1
含量(mg/L)
0.75
3.00
10.00
2.00
0.25
0.025
0.025
125
125
125
125
125
10
10
0.005
0.5
0.1
1
0.005
0.005
0.01
大豆+ 豌豆或粉蓝烟草
0.2
0.5
1
引自Kao和Michayluk,1975及Kao和Wetter,1977。
2
表4 原生质体培养的几种常用培养基 单位: mg/L
成 份
NT DPD D2a KM8P V-KM
无机盐
KNO3 950 1480 1480 1900 1480
NH4NO3 825 270 270 600 1444
CaCl2·2H2O 220 570 900 600 735
MgSO4·7H2O 1233 340 900 300 934
KH2PO4 680 80 80 170 68
KCl - - - 300 -
MnSO4·H2O - - - 10.0 10.0
MnSO4·4H2O 22.3 7.2 5.0 - -
KI 0.83 0.25 0.25 0.75 0.75
CoCl2·6H2O - 0.01 0.01 0.025 0.025
CoSO4·7H2O 0.03 - - - -
ZnSO4·7H2O 8.6 1.5 1.5 2.0 2.0
CuSO4·5H2O 0.025 0.015 0.015 0.025 0.025
H3BO3 6.2 2.0 2.0 3.0 3.0
Na2MoO4·2H2O 0.25 0.1 0.1 0.25 0.25
Na2-EDTA 37.3 37.3 37.3 - 37.3
FeSO4·7H2O 27.8 27.8 27.8 - 27.8
Seqestrene 330 Fe - - - 28 -
糖类和糖醇
葡萄糖 - - 0.4mol/L 68,400 108,900
蔗糖 10,000 17,100 17100 250 250
果糖 - - - 250 250
核糖 - - - 250 250
木糖 - - - 250 250
甘露醇 127,520 55,000 - 250 250
鼠李糖 - - - 250 250
纤维二糖 - - - 250 250
山梨醇 - - - 250 250
甘露糖 - - - - 250
维生素和有机酸
肌醇 100 100 100 100 100
盐酸硫胺素VB1 1 4.0 4.0 1 1
盐酸吡哆醇VB6 - 0.7 0.7 1 -
烟酸 - 4.0 4.0 - 1
烟酰胺 - - - 1 -
抗坏血酸 - - - 2 2
氯化胆碱 - - - 1 1
泛酸钙 - - - 1 1
叶酸 - 0.4 0.4 0.4 0.4
核黄素 - - - 0.2 -
3
对氨基苯甲酸
生物素
维生素A
维生素D3
维生素B12
柠檬酸
苹果酸
延胡羧酸
丙酮酸钠
氨基乙酸
其他有机添加物
椰子乳
水解 酪蛋白
生长调节剂
2,4-D
6-BA
NAA
IAA
2,4,5,-T
玉米素
pH
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
0.04
-
-
-
-
-
-
-
1.4
-
-
1.3
0.4
-
-
-
-
5.8
-
0.04
-
-
-
-
-
-
-
1.4
5%
-
-
0.6
1.5
-
0.5
-
5.7
0.02
0.01
0.01
0.01
0.02
40
40
40
20
2
20(ml)
250
0.2
-
1.0
-
-
0.5
5.6
0.02
0.01
0.01
0.01
-
40
40
40
20
-
20(ml)
250
-
0.4
1.5
1.0
-
-
5.7
-
-
-
1.0
3.0
-
-
-
5.8
注: NT: Nagata & Takebe,1971; DPD: Durand 等,1973; D2a: 李向辉等,1981; KMP8: kao & Michayluk,1975; V-KM: Binding & Nehl,1979。
细胞筛孔径(μm)与目换算表
目
20
30
40
50
60
80
100
孔径
900
600
450
355
280
180
154
目
120
140
150
160
180
200
250
孔径
125
105
100
98
90
76
61
目
280
300
320
325
350
360
400
孔径
55
50
45
43
41
40
38.5
目
500
600
700
800
孔径
30
20
15
10
目(mesh)即为
每英寸的孔数
4
植物组织培养常用缩略语
ADE adenine
KT kinetin(6-Furfurylaminopurine)
BA 6-benzyladenine
BAP 6-benzylaminopurine
ZT zeatin
2-iP 6-(γ,γ-dimethylallylamino)purine
或2-isopentenyladenine
2,4-D 2,4-dichlorophenoxyacetic acid
NAA α-naphthaleneacetic acid
IAA indol-3-acetic acid
IBA indol-3-butyric acid
CCC chlorocholine chloride
CH casein hydrolysate
LH lactalbumin hydrolysate
CM coconut milk
ME malt extract
YE yeast extract
EDTA ethylenediaminetetraacetate
GA3 gibberellic acid
DMSO dimethylsulfoxide
PEG polyethylene glycol
PVP polyvinylpyrrolidone
AC activated carbon
UV ultraviolet (light)
lx lux
mol mole
W/V weight/volume (concentration)
腺嘌呤
激动素(6-糖氨基嘌呤)
6-苄基腺嘌呤
6-苄氨基嘌呤
玉米素
二甲基丙烯嘌呤
2,4-二氯苯氧乙酸
萘乙酸
吲哚乙酸
吲哚丁酸
矮壮素
水解酪蛋白
水解乳蛋白
椰子汁
麦芽浸出物
酵母浸提物
乙二胺四乙酸
赤霉素
二甲基亚砜
聚乙二醇
聚乙烯吡咯烷酮
活性炭
紫外光
勒克司(照度单位)
摩尔
重量/容积(浓度)
5
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