2024年3月12日发(作者：驱动精灵限速)

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７４２・　

山西医药杂志２０１１年８月第４０卷第８期上半月　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ａｕｇｕｓｔ　２０１１，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．８　ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　

奥沙　利铂纳米结构脂质载体的处方研究　

中国医科大学附属第一医院（１１０００１）　周　晖　刘　美　

沈阳药科大学药学院　邱立鹏　王东凯　

【摘　要】　目的　研究奥沙利铂纳米结构脂质载体最佳处方。方法采用正交设计法，以包封率为指标，对　

奥沙利铂纳米结构脂质载体的最佳处方进行实验研究。结果　优化的最佳处方为单硬脂酸甘油酯（ＧＭＳ）与中　

链甘油三酸酯（ＭＣＴ）的质量比为３：２；大豆磷脂（ＰＣ）用量为２．０　；ＥＬＰ用量为２．０％。结论　此优化处方具　

有较好的粒度和包封率。　

【关键词】正交试验；　药物载体；　处理药物；　包封率　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ　Ｌｏａｄｅｄ　ｎａｎｏｓｔｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄ　ｃａｒｒｉｅｒｓ　ＺＨＯＵ　Ｈｕｉ　，ＬＪＵ　Ｍｅｉ．ＱＩＵ　Ｌｉ—ｐｅｎｇ，　

Ｗ＿ＡＮＧ　Ｄｏｎｇ—ｋａｉ．　Ｐ　Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ．Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１０００１。Ｃｈｉｎａ　

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｃｈｏｏｓｅ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ　Ｌｏａｄｅｄ　Ｎａｎｏｓｔｕｃｔｕｒｅｄ　Ｌｉｐｉｄ　Ｃａｒｒｉｅｒｓ．　

Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｄｅｓｉｇｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｗｉｔｈ　ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ａｓ　ｔｈｅ　ｉｎｄｅｘ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉ—　

ｍｕｍ　ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ　ｏｆ　ＧＭＳ　ａｎｄ　ＭＣＴ　ｗａｓ　３：２；Ｔｈｅ　ａｍｏｕｎｔ　ｏｆ　ＰＣ　ａｎｄ　ＥＬＰ　ｗｅｒｅ　２．０　ａｎｄ　２．０　．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｏｐｔｉ—　

ｍｕｍ　ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ　ｃａｎ　ｂｅ　ｇｏｏｄ　ｗｉｔｈ　ｓｍａｌｌ　ｐａｒｔｉｃｌｅ　ｓｉｚｅ　ａｎｄ　ｓｌｉｇｈｔｌｙ　ｈｉｇｈ　ｄｒｕｇ　ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ．　

［Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ；Ｄｒｕｇ　ｃａｒｒｉｅｒｓ；Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｓ　ｄｒｕｇ；　Ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　

奥沙利铂（ｏｘａｌｉｐｌａｔｉｎ，ＯＰ）是一种新型铂类抗　

癌药物，临床一线用于治疗转移性结肠、直肠癌，但　

由于其脂溶性差，妨碍其在脂质给药系统中的包　

裹，因而其临床应用及剂型开发均受到很大限　

制ｌ＿】］。纳米结构脂质载体（ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄ　

温磁力搅拌器（巩义市英峪予华仪器厂）；超声波清洗器（浙　

江象山县石蒲海天电子仪器厂）；旋转蒸发仪ＥＲ５２—９９（中　

国上海亚荣生化仪器厂）；ＢＳ１１０Ｓ型电子天平（北京赛多利　

斯仪器系统有限公司）；ＬＣ一１０ＡＴ型高效液相色谱仪（日　

本岛津公司）。　

ｃａｒｒｉｅｒｓ，ＮＬＣ）是从固体脂质纳米粒（ＳＬＮ）发展而　

来的新一代纳米粒传输系统，它是以生物相容的脂　

质材料为载体，将药物或其他的生物活性物质溶解　

或包裹于脂质核或者是吸附、附着于纳米粒表面的　

新型载药系统，它的特点是提高药物载药量，改善　

药物吸收，改变药物体内过程，具有缓释、控释、提　

２方法与结果　

２．１　奥沙利铂纳米结构脂质载体的制备　

采用乳化超声法制备。称取处方量的ＯＰ、ＧＭｓ、ＭＣＴ　

和ＰＣ，加入适量甲醇溶解后，减压旋蒸除去甲醇，于８０。Ｃ　

下加热搅拌作为油相；称取处方量的ＥＬＰ加入相同温度的　

水溶液中，作为水相；然后在搅拌的条件下将水相滴加到油　

相中制成初乳，最后将初乳通过超声细胞粉碎机超声，冰水　

高药物稳定性、增强疗效和降低不良反应等方面的　

优势［２。］。本实验考虑将奥沙利铂制成纳米结构脂　

浴冷却即得奥沙利铂纳米结构脂质载体（ＯＰ—ＮＬＣ）。　

２．２　ＯＰ－ＮＬＣ的包封率测定　

２．２．１　检测波长的确定：以甲醇为溶剂，将ＯＰ配制成适　

量浓度的溶液，以甲醇为空白，于２００￣４００　ｎｍ波长范围内　

质载体，以期望得到更高的药物包封率，增强疗效　

和降低毒副作用。本文采用正交设计法，以包封率　

为考察指标，对奥沙利铂纳米结构脂质载体原料及　

处方进行优化，取得具有较高包封率的最优处方。　

绘制紫外吸收光谱，结果显示ＯＰ在（２４９．０士２．Ｏ）ｎｍ波长　

处有最大吸收，故选择２５０　ｎｍ作为检测波长。　

２．２．２色谱条件：色谱柱：ＯＤＳ　Ｃ１８柱（迪马，４．６　ｍｉｔｔ×２５０　

ｒｉｌｒｎ，５　ｍ）；流动相：甲醇一水（１０：９０）；流速：１．０　ｍＬ／ｍｉｎ；　

检测波长：２５０　ｈｉｌｌ；温度：２５℃。　

２．２．３系统适应性试验：量取ＯＰ—ＮＬＣ　１　ｍＬ于１Ｏ　ｍＬ容　

１材料与仪器　

奥沙利铂（山东铂源化学有限公司，批号０８０２１３）；注　

射用大豆磷脂（ＰＣ）上海太伟药业有限公司，批号０６０２１３）；　

单硬脂酸甘油酯（ＧＭＳ，长沙市有机试剂厂批号０６１１０２）；　

中链甘油三酸酯（ＭＣＴ，北京凤礼精求商贸责任有限公司　

批号０７１２２４，）；Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ　ＥＬＰ（ＢＡＳＦ公司）；ＪＹ９２一ＩＩ　

量瓶中，加甲醇超声后定容，用０．４５“ｍ微孔滤膜过滤，取　

续滤液，即得破乳供试品溶液；同法制得空白ＮＬＣ破乳供　

试品溶液。分别取上述２种供试品溶液２Ｏ　Ｌ注入液相色　

谱仪，记录色谱图，最终结果显示所用辅料对ＯＰ的测定无　

干扰。　

超声细胞粉碎机（宁波新芝科器研究所）；９Ｏ一２型定时恒　

基金项目：沈阳市科学技术计划项目（１０９１１７４—１—０１）　

２．２．４标准曲线的绘制：精密称取ＯＰ对照品５０　ｍｇ，置　

山西医药杂志２０１１年８月第４Ｏ卷第８期上半月　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ａｕｇｕｓｔ　２０１１，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．８　ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　

２５　ｍＬ量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，制成２　ｍｇ／ｍＩ　的　

溶液，分别精密吸取０．２５、０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０　ｍＬ　

置于１０　ｍＬ量瓶中，用水稀释至刻度，照上述色谱条件测　

定，以浓度（＃ｇ／ｍＬ）为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准　

曲线，方程为：Ａ一１６　５４０　Ｃ＋２　７１４，Ｒ＝０．９９９　９。　

２．２．５精密度试验：取ＯＰ适量，精密称定，加水溶解并定　

量稀释制成每１　ｍＬ中约含０．４　ｍｇ的溶液，精密量取２Ｏ　

Ｌ注入液相色谱仪，连续进样５次，记录色谱图，计算峰面　

积和ＲＳＤ值，结果表明仪器的精密度符合要求。　

２．２．６　回收率试验：取ＯＰ约２Ｏ　ｍｇ，共６份，精密称定，置　

５０　ｍＬ量瓶中，加人２　ｍＬ空白ＮＬＣ，按“２．２．３”项下制成　

供试品溶液，照“２．２．２”项下的方法测定，结果表明，该方法　

回收率良好，辅料无干扰。　

２．２．７包封率的测定：包封率采用超滤离心法测定。精密　

量取ＯＰ－ＮＬＣ　１　ｍＬ于１０　ｍＬ容量瓶中，加甲醇超声后定　

容，用０．４５Ⅱｍ微孔滤膜过滤，取续滤液，以高效液相色谱　

法（ＨＰＬＣ）测定药物总量ｗ　。将ＮＬＣ加入超滤杯中，密　

闭后氮气加压超滤，搅拌一段时间后接续滤液，过０．４５　ｆｆｍ　

微孔滤膜，以ＨＰＬＣ法测定水相中药物的量ｗ７ｋ。药物包　

封率ＥＲ（　）一（ｗ　—Ｗ　）／Ｗ　。以上述最优处方制得三　

批ＯＰ－ＮＬＣ，测得平均包封率为７７．４　。　

２．３　ＯＰ—ＮＬＣ处方优化　

通过单因素试验考察及参考文献［４，５］资料，选用　

ＥＬＰ和ＰＣ为表面活性剂，ＧＭＳ为固体脂质，ＭＣＴ为液态　

脂质。以包封率（ＥＲ　）为评价指标，选择ＧＭＳ与ＭＣＴ　

的质量比（ＧＭＳ／ＭＣＴ）（Ａ）、ＰＣ用量（Ｂ）、ＥＬＰ用量（Ｃ）３　

个因素设计正交实验，对ＯＰ—ＮＬＣ的处方进行优化。每　

个因素选３个水平，按正交设计的原理进行实验，结果详见　

表１～３。　

表１正交设计的因素水平　

１．０　

１．０　

１．５　２．ｏ　

２．０　３．０　

１．０　２．０　

１．５　

３．０　

２．０　

１．０　

１．０　３．０　

１．５　

１．ｏ　

２．０　

２．ｏ　

０　６０．０ｏ　６５．００　

７　６５．６６　

６６．００　

０　７１．ｏｏ　

６５．６７　

０　１１．００　１．００　

表３变量分析　

由表２可知，以包封率为衡量指标进行直观分析，由极　

差Ｒ确定主次因素顺序：Ａ＞Ｂ＞Ｃ。其中，Ａ因素：Ｋ　＞Ｋｚ　

＞Ｋ１；Ｂ因素：Ｋ３＞Ｋ２＞Ｋ１；Ｃ因素：Ｋ２＞Ｋ３＞Ｋ１。因此，　

确定Ａ３Ｂ３Ｃ２为较优处方，即ＧＭＳ与ＭＣＴ的质量比为　

３：２；ＰＣ用量为２．０　；ＥＬＰ量为２．０％　

由表３可知，ＧＭＳ／ＭＣＴ（Ａ）、ＰＣ的用量（Ｂ）对药物的包　

封率均有显著影响，ＥＬＰ的用量（ｃ）对药物包封率影响较小。　

３讨　论　

单因素试验考察了固体脂质、液体脂质、表面活　

性剂的种类和用量以及制备温度和超声次数等影响　

因素。硬脂酸、棕榈酸、油酸、大豆油等形成的ＮＬＣ　

放置较短时间有药物析出，稳定性较差，可能是由于　

奥沙利铂在其溶解度小的原因。表面活性剂若采用　

文献［６］报道的Ｆ６８，经过实验结果表明虽然超声后　

可以得到较好的ＮＬＣ混悬液，但是放置一段时间后　

逐渐浑浊，可能是因为Ｆ６８易形成胶束，增大了药物　

在水中的溶解度，使粒子相互碰撞机会增加，最后粒　

子聚合甚至胶凝。本实验选用ＧＭＳ、ＭＣＴ和ＰＣ，　

取得较好效果。固体脂质与液体脂质的比例对制剂　

影响很大，当液体脂质比例较高时，制剂包封率较　

低，且放置易有药物析出，可能由于过量液体脂质的　

存在阻碍了固体脂质冷却时形成较好的纳米粒子。　

本实验加入了大豆磷脂，由于磷脂可以在液滴　

表面形成稳定的界面膜，并提供负电荷屏障，因此制　

备得到的ＯＰ－ＮＬＣ包封率较高，放置更稳定。此外，　

实验采用了ＥＬＰ，聚氧乙烯蓖麻油类是一个性能非　

常优良的非离子表面活性剂，具有优良的增溶能力　

和乳化能力，能解决大多数难溶性药物的低溶解度　

问题。试验结果也证明采用ＥＬＰ作为表面活性剂，　

可以使药物包封率稍有提高。由于ＯＰ为一脂水难　

溶性药物，因此实验制备ＯＰ－ＮＬＣ的包封率不很高，　

但与临床用量相比，其载药量达到了比较理想的量，　

一

方面是因为ＮＬＣ提高了ＯＰ的载药量；另外可能　

是ＥＬＰ和大豆磷脂结合了一些奥沙利铂。纳米制　

剂药物包封率的测定方法很多，本实验曾考虑选用　

超速离心法测包封率，然而在５０　０００　ｒ／ｍｉｎ，离心２　

ｈ的条件下，制剂基本不分层，无法得到准确的结　

果。最终选用超滤法进行包封率的测定，操作简单，　

耗时短，制剂分层比较理想。　

参考文献　

・７４４・　山哆匿药　志２０１１年８月第４ｏ卷第８期上半月　Ｓｈａｎｘｉ　Ｍｅｄ　Ｊ，Ａｕｇｕｓｔ　２０１１，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．８　ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　

沈阳药科大学学报，２００８，２５（３）：２３６—２４１．　

Ｅ５］周华锋，马全红，丁艺，等．咪喹莫特纳米结构脂质载体的可控　

制备及表征．工程学报，２００６，６（４）：５９８—６０２．　

［１］杨美燕，李煜蒙，梅兴国．奥沙利铂长循环热敏脂质体的包封率　

测定及体外释放考察．军事医学科学院院刊，２００７，３１（５）：５７．　

Ｅ２ｌ　Ｐａｒｄｅｉｋｅ　Ｊ，Ｈｏｍｍｏｓｓ　Ａ，Ｍｉｉｌｌｅｒ　ＲＨ．Ｌｉｐｉｄ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ（ＳＬＮ．　

ＮＬＣ）ｉｎ　ｃｏｓｍｅｔｉｃ　ａｎｄ　ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ｄｅｒｍａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ．Ｉｍ　Ｊ　Ｐｈａｒ，　

２００９，３６６：１７０—１８４．　

Ｅ６］杨平，孙进，刘凯，等．多西他赛纳米脂质载体的制备及其性质　

考察．沈阳药科大学学报，２００８，２５（３）：１７４—１７７．　

［３］Ｍａｉｌｅｒ　ＲＨ，Ｒａｄｔｋｅ　Ｍ，Ｗｉｓｓｉｎｇ　ＳＡ．Ｓｏｌｉｄ　ｌｉｐｉｄ　ｎａｎｏｐａｎｉｄｅｓ　

（ＳＬＮ）ａｎｄ　ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ　ｌｉｐｉｄ　ｃａｒｒｉｅｒｓ（ＮＬＣ）ｉｎ　ｃｏｓｍｅｔｉｃ　ａｎｄ　

（收稿日期：２０１１－０５—０７）　

作者简介：周晖：女，１９６９年３月生，副主任药师，中国医科大　

ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ．Ａｄｖ　Ｄｒｕｇ　Ｄｅｌｉｖ　Ｒｅｖ，２００２，５４　ＳｕｐＮ　

１：１３１—１５５．　

学附属第一医院，１１０００１　

［４３刘凯，孙进，何仲贵．新型纳米结构脂质载体系统的研究进展．　

・Ｉ临床护理・　

中药足浴治疗糖尿病周围神经病变的临床观察及护理　

湖北医药学院附属东风总医院（４４２００１）袁秀红

糖尿病周围神经病变（ＤＰＮ）是糖尿病最常见的慢性并　

发症之一，其发病率占糖尿病患者的６０％～９Ｏ　，如果遇到　

外伤与感染极易发生溃疡，不易愈合，从而导致截肢，使患者　

李国秀　

康教育，使其对糖尿病及其并发症有充分认识，同时多沟通、　

交流，使患者解除忧虑，保持乐观情绪、积极配合治疗。　

１．４疗效判断标准显效：自觉症状消失，腱反射正常或基本　

致残，给患者带来严重生活不便。自２００７－－２０１０年，笔者采　

用西医常规配合中药足浴的方法及护理治疗糖尿病周围神　

经病变６Ｏ例，临床疗效满意，现报告如下。　

１资料与方法　

１．１病例选择：６Ｏ例住院患者均符合世界卫生组织（ＷＨ０）　

正常，肌电图及神经传导速度恢复正常；有效：自觉症状明显　

减轻，腱反射有所改善，肌电图及神经传导速度不同程度改　

善；无效：自觉症状无好转，腱反射、肌电图及神经传导速度　

无改善。显效＋有效为总有效。　

２治疗结果　

确定的２型糖尿病诊断标准，并符合以下条件：①有明显的　

肢体感觉异常，出现末端疼痛、麻木、蚁行感、发凉或伴有无　

力等症状；②神经系统检查有不同程度的肢体深浅感觉障　

２组疗效比较：见表１。　

表１　２组疗效比较　

碍，膝、跟腱反射减弱或消失；③肌电图提示神经传导障碍；　

④排除其他原因所致的周围神经病变。随机分为２组，治疗　

组３Ｏ例，男性１８例，女性１２例，年龄３４～６８岁，糖尿病病　

程２～２Ｏ年，ＤＰＮ病程１～８年；对照组３０例，男性２Ｏ例，女　

性１０例，年龄３０￣７０岁，糖尿病病程１～１８年，ＤＰＮ病程　

３讨　论　

１～７年。２组一般资料差异无统计学意义（Ｐ＞Ｏ．ＯＳ）。　

１．２治疗方法：２组均严格控制饮食、血糖、血压及血脂。　

在此基础上，治疗组：用中药熏洗双足，主要药物组成：独活、　

ＤＰＮ多见足部麻木、疼痛，或伴发凉感，属中医“痹证”　

范畴，中医辨证病机为气血运行不畅，阻滞经络气机，经寒不　

利，瘀血痹阻，故治疗多以活血化瘀、温经活络为法。中药泡　

足方中以独活、威灵仙祛风活络、止痹痛，独活引药下行，使　

药直达病所；艾叶、桂枝、ＪＩＩ椒温经通络散寒，荆芥辛温疏散　

风邪，川芎活血止痛，共同达到温经通络，散寒止痛之效，改　

艾叶、荆芥、威灵仙、桂枝各３０　ｇ，川１芎２０　ｇ，川椒８　ｇ，由我院　

制剂室研磨粉碎至细粉末状并分袋包装。用法：将上药溶入　

全自动足浴机内约２　０００　ｍＬ温水中，调节温控装置３８～４２　

℃，并保持温度恒定，浸泡双足，设定时间３０　ｍｉｎ。对照组：　

给予甲钴胺０．５　ｍｇ肌肉注射。　

善微循环功能。经笔者临床观察，通过中药外用，既可扩张　

局部血管，又借水温热力使血流增快，药物经肌肤腠理直达　

１．３护理措施：操作前向患者讲解中药足浴的基本知识，使　

其能较快接受并配合治疗。调试洗液温度，以３８～４２℃为　

宜，温度过高会烫伤皮肤，过低则达不到应有的效果。在治　

疗过程中，严密观察患者的反应，保持药液恒温。做好足部　

检查，检查趾间、趾甲、足底皮肤有无水肿、鸡眼、红肿、甲沟　

炎、溃疡、坏死等。注意足部保暖，选择合适的鞋袜，鞋子轻　

巧柔软、前头宽大，袜子以弹性好，透气及散热性好的棉毛质　

地为佳，保持足部清洁，避免感染，勤换鞋袜。对患者进行健　

病所，药力较专，患者自觉症状如疼痛、麻木、发凉感等改善　

较明显，肢端感觉较前更灵敏。中药浸泡双足是局部外用的　

方法，未见明显不良反应。此疗法患者依从性好，可作为临　

床治疗ＤＰＮ有效的手段。　

（收稿日期：２０１１－０３—０２）　

作者简介：袁秀红，女，１９６８年５月生，主管护师，湖北医药学　

院附属东风总医院，４４２００１