2024年4月11日发(作者：)

TMB和HRP显色原理

TMB和HRP是两种常用的生化试剂，它们可以被用于检测蛋白质、

核酸等生物分子。这两种试剂在实验室中被广泛应用，尤其是在免疫

学和分子生物学领域。本文将介绍TMB和HRP显色原理的基本知识，

并探索它们在实验中的应用。

TMB显色原理

TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯基二胺）是一种常用的底物，它可

以被氧化酶催化剂转化成可见的蓝色产物。这种催化剂通常是过氧化

物酶（POD）或碱性磷酸酶（AP）。TMB的显色原理可以用以下反应式

表示：

TMB + H2O2 + POD/AP → OX-TMB + H2O

OX-TMB是一种氧化物，它的颜色比TMB更深。因此，当TMB被

氧化后，溶液会从无色或浅黄色变为蓝色或深紫色。这种反应的灵敏

度很高，因此可以用于检测很低浓度的蛋白质或其他生物分子。

HRP显色原理

HRP（辣根过氧化物酶）是一种常用的酶标记试剂，它可以与抗

体或其他分子结合，用于检测蛋白质、核酸等生物分子。HRP的显色

原理也是氧化还原反应。HRP可以将底物（如TMB）氧化成可见的产

物。HRP的显色原理可以用以下反应式表示：

HRP + H2O2 + Substrate → OX-Substrate + H2O

OX-Substrate是一种氧化产物，它的颜色比底物更深。因此，

当底物被氧化后，溶液会从无色或浅黄色变为蓝色或深紫色。这种反

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应的灵敏度很高，因此可以用于检测很低浓度的蛋白质或其他生物分

子。

应用

TMB和HRP显色原理在实验室中被广泛应用，尤其是在免疫学和

分子生物学领域。以下是一些应用示例：

1. 酶联免疫吸附试验（ELISA）

ELISA是一种常用的免疫学检测方法，它可以用于检测蛋白质、

抗体、荷尔蒙等生物分子。在ELISA中，TMB和HRP被用作底物和酶

标记试剂，用于检测特定分子的存在和浓度。这种技术被广泛应用于

医学、生物技术和环境监测等领域。

2. 蛋白质印迹（Western blot）

Western blot是一种常用的蛋白质检测方法，它可以用于检测

特定蛋白质的存在和表达量。在Western blot中，HRP被用作酶标

记试剂，用于检测特定蛋白质的存在和定量。这种技术被广泛应用于

生物医学和生物技术领域。

3. 免疫组化（Immunohistochemistry）

免疫组化是一种常用的组织学检测方法，它可以用于检测特定蛋

白质在组织中的分布和表达量。在免疫组化中，HRP被用作酶标记试

剂，用于检测特定蛋白质在组织中的分布和表达量。这种技术被广泛

应用于肿瘤学、生物医学和生物技术领域。

总结

TMB和HRP显色原理是一种常用的生化检测方法，它们可以用于

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检测蛋白质、核酸等生物分子。这种方法的灵敏度很高，因此可以用

于检测很低浓度的生物分子。TMB和HRP在实验室中被广泛应用，尤

其是在免疫学和分子生物学领域。这种方法的应用有助于深入了解生

物分子的结构和功能，并为生物医学和生物技术领域的研究提供有力

支持。

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