2024年4月13日发(作者:苹果ld注册官方网站)
第37卷第5期
文章编号:1003-2843(201 1)o5-0776.03
西南民族大学学报・自然科学版
Journal of Southwest University for Nationalities・Natural Science Edition
硫酸.蒽酮法测定糯米藤中多糖的含量
杨梅,吴昊,王晓玲
(西南民族大学少数民族药物研究所,四川成都610041)
摘要:目的:建立糯米藤Gonostegia hirta(B L_)Miq多糖含量的测定方法.方法:采用回流方法提取糯米藤中多糖,用
硫酸-蒽酮法测定糯米藤中多糖含量.结果:糯米藤中平均多糖含量为15.832mg/g,平均回收率为100.04%,RSD=0.98%
(n=5).结论:该含量测定方法简便、准确、重现性良好,可用于糯米藤的多糖含量测定.
关键词:糯米藤;多糖;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标识W-q:A
doi:10.3969 ̄.issn.1003-2483.201 1.O9.22
糯米藤别名糯米草、米浆藤、生扯拢、筲箕藤、红米藤、红饭藤等,为荨麻科糯米团属植物糯米团Gonostegia
hirta(BL.)Miq.的干燥全草【J J.主要分布在江苏、浙江、安徽、湖南、四川、云南、贵州、西藏、广东、广
西等地.糯米藤作为常用中药,具有清热解毒、健脾消积、利湿消肿、散瘀止血等功效,临床上常用于治疗乳痈、
肿毒、痢疾、消化不良、水肿、小便不利、外伤出血、痛经、跌打损伤、咳血、吐血、外伤出血等多种疾病【j 1.
此药在我国各民族多有使用 ,经查阅文献,目前对其的研究少见报道.2010年,周燕园等p 通过预试验对其化
学成分进行了初步研究,报道了该植物中可能含有鞣质、有机酸、黄酮类、酚类、香豆素或内酯类、强心苷类,多
糖等化学成分.
多糖是存在生物体内的一类高分子化合物,是维持生命活动正常运转的基本物质之一.大量研究表明:多糖
除具有免疫调节,抗肿瘤生物学效应外,还有抗衰老、降血糖、抗凝血等作用,且对机体副作用小tOl;多糖还可
以应用于保健食品方面,少剂量的活性多糖是防止衰老、增强免疫的佳品.目前关于糯米藤中多糖含量的测定研
究尚未见报道,本试验采用硫酸-蒽酮法测定糯米藤中多糖的含量,为糯米藤中多糖含量测定提供科学依据.
1 实验材料、试剂及仪器
糯米藤样品于2010年3月采自贵州天柱县,经本实验室鉴定为为荨麻科糯米团属植物糯米团Gonostegia
hirta(BL.)Miq.
D一无水葡萄糖(成都化学试剂厂);其余试剂均为国产分析纯.
北京普析通用UV-1901紫外分光光度计、METTLERAE240电子天平.SENCO W201恒温水浴锅
2实验方法及结果
2.1对照品溶液的制备
精密称取经50*(2干燥至恒重的无水葡萄糖0.1020g,加纯化水溶解于lOOmL容量瓶中,定容,摇匀,即得浓
度为1.02mg/mL的对照品溶液.
2.2供试品溶液的制备
精密称取干燥值恒重的糯米藤干粉1.0 g置于250mL圆底烧瓶中,加入80%乙醇-水20mL回流lh,过滤,残
渣用80%乙醇.水洗涤3次,收集残渣挥干,用30mL蒸馏水回流lh,过滤,残渣用蒸馏水洗涤3次,滤液置于
收稿日期:2011.04。l4
联系作者:王晓玲(1969一),女,副教授,博士.E-mail:wx13232@sina.com
第5期 杨梅等:硫酸一蒽酮法测定糯米藤中多糖的含量 777
lOOmL容量瓶中定容,备用.
2.3硫酸.蒽酮试剂的配制
称取蒽酮0.2g,缓慢加入lOOmL浓硫酸,边加边搅拌至黄色透明液,避光保存,现用现配.
2.4检测波长的选择
用移液管取葡萄糖标准溶液各2mL至具塞试管中,沿着各试管壁缓慢加入5mL冷的蒽酮试剂,摇匀后盖紧
振摇,沸水浴中加热lOmin,取出流水冷却20min,以没加入葡萄糖且按照上述相同方法配制的溶液为空白对照.在
200nm. ̄700nm的波长范围内扫描.精密移取供试品溶液2mL至具塞试管中,按上述方法处理后测定样品吸光
度,在200nm ̄700nm的波长范围内扫描.精密移取供试品溶液2mL至具塞试管中,不显色,在200nm ̄700nm
的波长范围内扫描.扫描结果见图l,试验表明,糯米藤多糖与葡萄糖在600nm处都有最大吸收,故选择600nm
为检测波长.
图1标准品溶液显色后的UV图(a) 供试品溶液显色后的UV图(b) 供试品溶液不经显色后的UV图(c)
2.5标准曲线的制备
分别精密量取O.O0、0.20、0.40、0.60、O.80、1.00、1.20mL的葡萄糖标准品溶液,置lO ml容量瓶中用蒸
馏水稀释至刻度吗,摇匀得系列标准溶液.用移液管分别量取上述溶液各2mL取葡萄糖标准溶液各2mL至具塞
试管中,按照2.4项下的方法进行操作.在600nm处测定吸光度A值,以吸光度值(y)为纵坐标,葡萄糖浓度(x,
mg/m1)为横坐标,经紫外可见分光光度计测定不同浓度葡萄糖光吸收值(y),绘制标准曲线图.回归方程为:
y=3.2632x-0.0848,R=0.9998.结果表明葡萄糖浓度在0.04088—0.12264mg/mL之间呈线性关系,满足含量测定要
求.
2.6精密度实验
移取5份同一葡萄糖对照品溶液,各2.0mL,按照2.4项下的方法进行操作,在600nm处测定其吸光度.计算
RSD=I.67%(n=5),表明方法的精密度良好.
2.7重现性实验
精确称取糯米藤粗粉约五份,各1.O g,按2.2项下的方法制备供试品,按样品测定方法操作平行测定,计算
多糖含量,求RSD=0.73%(n=5),表明方法的重现性良好.结果见表2:
表l 糯米藤供试品溶液重现性实验结果
2.8稳定性实验
移取同一供试品溶液,2.OmL,以没加样品按相同方法配制的溶液为空白对照,按照2.4项下测定其吸收光
度A值,每隔l小时测一次,测定样品吸收度,共测5小时,计算多糖含量,求RSD=0.17%(n=5),表明供试
品提取液在制备后5h内稳定性良好.结果见表2.
表2糯米藤供试品溶液稳定性实验结果
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2.9加标回收实验
西南民族大学学报・自然科学版 第37卷
取样品粉末1.0g,共5份,精密称定,放入250mL圆底烧瓶中,精密加入无水葡萄糖对照品10.1 lmg,按供
试品制备溶液并按2.4项方法测定样品吸光度,计算回收率,结果见表3.
表3糯米藤加标平均回收率实验结果
实验结果表明该方法回收率满足含量测定要求.
3讨论
(1)多糖是存在于自然界的醛糖或酮糖通过糖苷键连接在一起的聚合物(__・般10个以上).多糖是一切有生
命有机体必不可少的成分,它与维持生命的种种生理机能有着密切联系.多糖类化合物是多种中草药的有效成
分之一,某些多糖还具有抗癌、抗炎、抗病毒、提高免疫力等作用 J.用于粗多糖含量测定的方法有很多,蒽酮一
硫酸法是一种常用的方法,其原理是利用糖类遇浓硫酸脱水后生成糖醛或其衍生物,可与蒽酮试剂缩合,反应
后溶液呈蓝绿色,于600 nm处有最大吸收,显色深度与多糖的含量呈线性关系.此法显色灵敏,操作简便时间
短,因此减少了操作误差,因此它很适合野生植物糖类含量的测定,为野生植物的开发利用提供依据.
(2)本实验从糯米藤中提取出植物多糖,并用硫酸-蒽酮法对其多糖含量进行了测定.研究表明,用上述含
量测定方法测定的5份糯米藤中多糖的平均含量为15.832mg/g.因此该方法可以作为糯米藤中多糖含量的测定
方法.糯米藤中多糖的结构组成和生理活性还有待进一步研究.
参考文献
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Determination of polysaccharide from Gonostegia hirta(BL.)Miq.by
anthrone.sulfuric acid method
YANG Mei,WU Hao,WANG Xiao-ling
(Ethnic Pharmaceutical Institute,Southwest University for Nationalities,Chengdu 610041,E1LC.)
Abstract:0bjective:To establish a sepectrophotometric method orf he tdetermination of the polysaccharides in Gonostegia
hirta(BL.)Miq.Methods:Polysaccharides are obtained by reflux extraction,the contents are determined by the mehod tof
anthrone-sulfuric acid.Results:The average contents of polysaccharides in Gonostegia hirta(BL.)Miq are 7.916mg/g,the
average recovery is 100.04%,RSD=0.98%(n=5).Conclusion:The experiment method is convenient and accurate,and could
be used orf the determination ofpolysaccharides in Gonostegia hirta(BL)Miq.
Key words:Gonostegia hirta(BL.)Miq polysaccharide;contents determination
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