2024年2月11日发(作者：世界顶级音响十大名牌)

甘薯褪绿矮化病毒RNaSe3蛋白的原核表达及抗血清制备

秦艳红;乔奇;王爽;张德胜;王永江;田雨婷;张振臣

【期刊名称】《植物保护》

【年(卷),期】2018(044)003

【摘 要】以本实验室保存的重组质粒为模板,利用PCR方法扩增获得了甘薯褪绿矮化病毒SPCSV的RNase3基因, RNase3基因由690个核苷酸组成,编码229个氨基酸.将RNase3基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE分析.结果表明,RNase3在大肠杆菌中能高效表达,融合蛋白分子量约为26.5 kD.以表达的融合蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPCSV-RNase3的特异性抗血清.ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清对RNase3融合蛋白的效价达10万倍.%With the recombinant plasmid stored in

our laboratory as template,RNase3 gene of Sweet potato shlo-rotis stunt

virus(SPCSV)was amplified by full-length RNase3 gene consists of

690 nt and encodes 229 amino acid RNase3 gene was cloned

into expression vector pET-28a(+)for over-expression in pro-karyotic

recombinant plasmid pET-RNase3 was transformed into

Essherishia soli strain BL2 1(DE3) competent -PAGE result showed

that specific fusion protein with the molecular weight of about 26.5 kD was

produced after induction by IPTG,indicating that the RNase3 fusion protein

was highly expressed in prokary-otic expressed protein was

purified from SDS-PAGE and the antiserum against RNase3 protein was

raised in -ELISA detection indicated that the titer of RNase3

antiserum was over 1:100000 against RNase3 fusion protein.

【总页数】4页(P138-141)

【作 者】秦艳红;乔奇;王爽;张德胜;王永江;田雨婷;张振臣

【作者单位】河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室,郑州 450002;河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室,郑州 450002;河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室,郑州 450002;河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室,郑州 450002;河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室,郑州 450002;河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室,郑州 450002;河南省农业科学院植物保护研究所,河南省农作物病虫害防治重点实验室,农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室,郑州 450002

【正文语种】中 文

【中图分类】S432.41

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