2024年5月13日发(作者：不用实名认证也不用登录的游戏)

用两种方法检测乙肝表面抗原结果分析

目的 了解用ELISA法检测乙肝表面抗原和用化学发光法检测表面抗原两者

之间的结果情况。方法 采集320例就诊人员的血液标本，分别用化学发光法与

ELISA法检测。结果 320份标本中，发光法检测出40份阳性，280份阴性。ELISA

法检测出42份阳性，278份阴性。经χ2检验两者无显著性差异（P>0.05）。结论

ELISA法成本比较低，耗时长，实验的影响因素比较多，易出现假阳性。化学发

光法成本高，所需时间短，干扰因素少，不易出现假阳性。

标签：乙肝表面抗原；ELISA；化学发光

流行病学调查结果显示，我国的乙型病毒肝炎感染性约达10%，乙肝的实验

检测对其防治具有非常重大的意义[1]。乙型肝炎病毒乙肝表面抗原（HBsAg）

是乙肝病毒的外壳蛋白，它可存在于患者的血液、唾液、乳汁、汗液、泪水、鼻

咽分泌物、精液及阴道分泌物中。随着科学越来越进步，检测的手段也越来越多。

自20世纪70年代至今，诸多高敏感性的检测方法被广泛应用于临床免疫学的检

测中，当中应用最为广泛的就属酶联免疫法（enzyme linked Immunosor bent assay，

ELISA）[2]。近几年，化学发光微粒子免疫分析法（chemiluminescent microparticle

immunoassay，CMIA）正逐渐发展，是一种敏感性较强的临床免疫学检测方法，

有效解决了低浓度乙型肝炎病毒乙肝表面抗原的检测难题[3]。现用ELISA法，

化学发光法，这两种方法检测的相关性进行探讨。

1 资料与方法

1.1一般资料 标本来自于我院2016年3月1日～3月5日体检人员，共320

例，男198例，女122例，年龄18～72岁，平均年龄为（39.5±8.4）岁。

1.2标本采集 用红头采血管，真空抽取静脉血3 ml，标本静置后离心提取血

清。

1.3检测试剂与仪器 一种采用雅培化学发光HBsAg定量检测试剂盒，标本

离心后，按照雅培I2000化学发光仪的操作规程检测。试剂源自美国雅培公司，

批准文号为70318HN00，仪器为美国雅培公司生产的i2000r化学光分析仪。另

一种采用英科新创HBsAg酶联免疫吸附试剂盒，安图酶标仪，按照说明书的操

作步骤进行。试剂由英科新创（厦门）科技有限公司提供，批准文号为

2008095514，主要仪器为酶标仪（型号：伯乐680）、恒温水浴箱（生产企业：

上海博讯公司医疗器械厂）。

1.4结果阳性的判读 化学发光法检测含量>0.05为阳性。ELISA法：检测标

本的OD值/0.105>1为阳性。

2 结果

320份标本，ELISA法检测出278份阴性，42份阳性，其中40份阳性的OD

值>0.5，2份标本的OD值<0.5。化学发光法检测出40份阳性，其中ELISA法

检测的那2份OD值<0.5的阳性标本检测为阴性。最后再用ELISA法重新检测

这两份标本，结果最终显示又为阴性，与化学发光法结果相符。

3 讨论

ELISA法检测HBsAg是标本中存在的乙肝表面抗原与固相载休表面的抗体

相结合，放入恒温箱，通过一段时间的反应，再进行洗涤拍干后加入酶标记的抗

体，反应一定时间后，再进行洗涤拍干，最后加显色剂，与固相载体表面复合物

相反应，如果存在乙肝表面抗原抗体复合物就会出现一定的颜色反应，呈现阳性。

化学发光法将待测标本与生物素标记的单克隆抗体、三氯联吡啶钌标记单克隆抗

体、链酶亲和素标记磁性微粒加入到反应杯中共同温育，形成磁性微珠包被抗体

-抗原-发光剂标记抗体复合物。经仪器内的缓冲液冲洗，当磁性微粒流经电极表

面时，被安装在电极下的磁铁吸引住，而游离的发光剂标记抗体被冲走。同时在

电极加电压，启动电化学发光反应，使发光试剂标记物三氯联吡啶钌和TPA在

电极表面进行电子转移，产生电化学发光，光的强度与待测抗原的浓度成正比。

全自动化学发光法所有的操作控制由仪器操作，具有灵敏度，准确率高，无辐射

及快捷方便等优点[4]，避免了各种交叉污染，标本加错的可能性，避免了温度，

时间控制偏差等。在ELISA法测定中影响因素较多，操作中的各个环节对试验

的检测结果影响较大，在临床检验中除正常反应外，有时常可见到一些错误的结

果（即假阳性或阴性结果）[5]。如在人工加标本，加酶结合物，加底物，可能

产生气泡或溅出等人为的不当操作，特别是洗涤在ELISA中决定着实验的成败，

标本中的非特异性的干扰物质吸附于固相载体上后，如果没洗脱掉，就会产生假

阳性，错误的结果。

320份标本中两种方法检测虽没有显著性差异，但有2份标本结果不相符，

通过ELISA法一旦报告给患者，就会引起多方面的麻烦。化学发光法虽所需时

间短，干扰因素少，不易出现假阳性，但成本高。由于ELISA法成本比较低，

检测的价格便宜，虽耗时长，实验的影响因素比较多，易出现假阳性，但大多数

健康体检人员还是比较喜欢采用此种方法。所以作为临床检验人员在操作的过程

中一定要仔细，不得马虎，对于像这种OD值<0.5标本一定要重新检测，排除人

为因素。

综上所述，在乙型肝炎病毒乙肝表面抗原的检测上，ELISA法成本比较低，

耗时长，实验的影响因素比较多，易出现假阳性。化学发光法成本高，所需时间

短，干扰因素少，不易出现假阳性。

参考文献：

[1]卫晓青，黄秋芳，戴悦，等.低水平HBsAg3种方法检测结果比较[J].检验

医学与临床，2013，10（3）：283-284.

[2]李秀梅，刘秋霞，阎泽君，等.ELISA法检测乙肝表面抗原出现假阳性结

果分析[J].慢性病学杂志，2010，12（9）：1037-1038.

[3]马跃飞，高丽钦， 林晓丽.ELISA法检测乙型肝炎表面抗原假阳性的影响

因素[J].国际检验医学杂志，2010，31（10）： 1176-1177.

[4]孙永惠. 浅议化学发光法诊断系统检测乙型肝炎表面抗原[J]. 医学信息，

2013，26（8）：604-605.

[5]迟婉利，孔祥民. ELISA检测乙肝病毒表面抗原假阳性原因分析[J].中国误

诊学杂志，2011，11（9）：2050-2050.编辑/哈涛