2024年6月10日发(作者：)

标记免疫分析与临床

　２０２１

年

５

月第

２８

卷第

５

期

７８５

/

２０１９

新型冠状病毒特异性

IMIG

抗体

gg

检测假阳性回顾性分析

１

例

()

首都医科大学石景山教学医院

,

北京市石景山医院检验科

,

北京

１０００４３

摘要

:

目的

　

回顾性分析新型冠状病毒特异性抗体

IM

假阳性一例的影响因素

.

方法

　

通过采集患者血清进行类风湿因

g

、、,

子

(

补体

(

抗核抗体

(

及抗

rheumatoidfactorRFＧIM

,

RFＧIA

,

RFＧIG

)

comlementC３

,

C４

)

antinuclearantibodANA

)

gggpy

,

的测定以探讨造成新型冠状病毒特异性抗体

IetideCCP

)

M

假阳性的因素

.

结果

　

除了酶联免疫吸附法检测该患者

ppg

再用散射比浊法测定同一份标本

RRFＧIM

弱反应外其余均为阴性

,

FＧIM

结果低于检测线

.

由于实验室条件限制没能

gg

将所有可能造成假阳性的外源性因素都探查一遍

,

所以最终没能查出真正的影响因素

.

结论

　

建议核酸测定最好联合胶

一定要综合分析判断再进行结果解读

,

避免误诊

.

关键词

:

新型冠状病毒肺炎

;

　２０１９

新型冠状病毒

;

　IM

抗体

;

　IG

抗体

;

　

假阳性

gg

中图分类号

:

R３７３．９　　

文献标识码

:

A

、,、

核抗体谱

(

核周因子

(

抗环瓜氨酸肽

(

antinuclearantibodectrum

,

ENA

)

erinuclearfactorAFP

)

antiＧccliccitrullinate

y

s

ppy

贺

　

岩

,

张迎久

,

秦晓燕

,

孙艳艳

体金法和化学发光法两种抗体检测方法

.

核酸检测与抗体检测的联合可提高诊断效率

,

当检测结果出现不一致情况时

,

OneRetrosectiveCaseStudfFalsePositiveforNovel

py

o

Coronavirus２０１９ＧnCoVIMandIGTests

gg

:

AbstractObectiveToretros

ectivelnalzetheinfluencinactorsofafalse

p

ositivecaseofNovel

j

py

a

yg

f

,

CoronavirussecificIMantibod．MethodsRheumatoidfactor

(

RFＧIM

,

RFＧIA

,

RFＧIG

)

comlement

pgygggp

(,

C

,

a

,

a

,

p

C３４

)

ntiＧnuclearantibodANA

)

ntiＧnuclearantibodectrum

(

ENA

)

erinuclearfactor

y

(

y

s

p

(),

AFPandantiＧccliccitrullinate

p

etide

(

CCP

)

weredetectedberumcollectiontodetectthefactors

ypy

s

(,,)

ShiinshanTeachinositalofCaitalMedicalUniversitBeiinhiinshanHositalBeiin

０００４３

,

China

jgg

H

ppyjg

S

jgpjg

１

,

HEYan

,

ZHANGYiniuQINXiaoan

,

SUNYanan

gjyy

causinalse

p

ositiveIMsecificforNovelCoronavirus．ResultsTheresultsofRFＧIMinthesamesecimen

g

f

gpgp

secimendetectedbhescatterinurbidimetricmethodwerelowerthanthedetectionline．Duetothe

py

t

g

t

,

alimitationoflaboratoronditionsllexoenousfactorsthatmaausefalse

p

ositivescouldnotbe

y

c

gy

c

,

investiatedsotherealinfluencinfactorscouldnotbeidentifiedinthisstud．ConclusionItisrecommended

ggy

nucleicacidtestandantibodestcanimrovethedianosticefficienc．Whenthetestresultsare

y

t

pgy

,

inconsistentitisnecessaromakecomrehensiveanalsisand

j

udmentbeforeinterretinheresultsto

y

t

pygpg

t

avoid

p

otentialmisdianosis．

g

:;;

Keords

COVIDＧ１９

;

　２０１９ＧnCoV

;

　I

Mantibod

　I

Gantibod

　Afalse

p

ositive

y

w

gygy

wereneativeexcetfortheweakRFＧIMreactiondetectedbLISA．TheresultsofRFＧIMinthesame

gpgy

E

g

tocombinecolloidal

g

oldassandchemiluminescenceassaithnucleicacidassa．Thecombinationof

y

a

y

w

y

尽早

　　

随着新型冠状病毒筛查检测的全面展开

,

筛查出无症状感染者是目前

COVIDＧ１９

防控的关

１

]

.«

例多次核酸阴性而延误诊断

[

新型冠状病毒肺

[

２

]

»

炎诊疗方案

(

试行第七版

)

血清学检测中指出

,

新

键

.

当然

COVIDＧ１９

确诊的金标准还是核酸检测

,

但受样本采集部位

、

时机

、

方法以及样品保存

、

运输

、

核酸提取

、

检测试剂检出能力等多因素影响

,

不少病

:/

DOI１０．１１７４８bmi．ssn．１００６－１７０３．２０２１．０５．０１５

jy

收稿日期

:

修回日期

:

２０２１Ｇ０３Ｇ２８

;

２０２１Ｇ０４Ｇ２２

通讯作者

:

孙艳艳

.

型冠状病毒特异性

IM

抗体多在发病

３~５d

后开

g

始出现阳性

,

IG

抗体滴度恢复期较急性期有

４

倍

g

及以上增高

.

但即使检测出

SARSＧCoVＧ２

特异性

７８６

IM

、

IG

抗体阳性仍需结合临床及核酸检测等综合

gg

诊断

.

２０１９nCoVIM

和

IG

抗体检测对核酸检测

g

g

容易漏检的问题是很好的互补

,

将在

COVID１９

的诊

断

、

治疗监测和病程转归等方面提供更多的临床数

３

]

.

因此

I

/

据

[

MIG

抗体检测作为新型冠状病毒

gg

,

LabeledImmunoassas&ClinMedMa．２０２１

,

Vol．２８

,

No．５

yy

查发现肠息肉

,

于

２０２１

年

１

月

２９

日来我院消化科

进行肠镜复诊

,

需要进行新冠筛查

.

咽拭子新型冠

状病毒核酸检测

(

之江公司试剂

,

批号

P２０２１０１５９

)

结果阴性

;

抗体检测

,

静脉采血测定血清特异性

IM

g

和

I

博奥赛斯公司试剂

)

结果

IG

抗体

(

M

为阳性

gg

反应

,

继续进行抗体验证实验测定

IA

阴性

,

总抗

g

体测定阳性反应

,

特异性抗体

IM

、

IG

、

IA

采用间

ggg

接化学发光法测定

,

总抗体测定采用的是双抗原夹

心法

.

抗体检测

(

万孚丽珠公司试剂

)

采用胶体金层

析法

,

结果

IM

和

IG

抗体均阴性

.

核酸和抗体均

gg

出现的抗体

,

被喻为机体特异性抗感染的

“

先头部

,

队

”

检测

IM

抗体可早期诊断感染

.

IG

抗体产生

gg

较晚

,

但其血清水平较高

、

维持时间长

、

亲和力高

,

因

此

IG

抗体阳性提示感染处于中后期或既往感

g

５Ｇ６

]

.

与患者联系建议复查并居家暂时隔离观

染

[

的辅助检测方法在各个医院全面展开

.

»

新型冠状病毒肺炎诊疗方案

(

试行第八版

)

　　

«

诊断标准指出

,

在疑似病例中同时具备新型冠状病

/

毒特异性抗体

IMIG

抗体阳性或新型冠状病毒

gg

特异性抗体

IG

由阴性转为阳性或恢复期抗体滴度

g

较急性期有

４

倍及以上增高可作为确证病例的诊断

指标之一

.

但是不同方法之间检测结果存在较大差

[

４

]

由本院检测

.

IM

抗体是初次体液免疫应答中最早

g

异

,

而且发现抗体的检测结果易受多种因素影响

.

本研究报道

１

例不同部位采集的标本在相隔

５d

进

其中发光法

I

确证实

d

采血检测抗体

,

M

两次阳性

,

g

验也两次为阳性

,

详细结果及判定标准见表

１

.«

新

[

４

]

»

型冠状病毒肺炎诊疗方案

(

试行第八版

)

诊断标

行了

２

次核酸检测均阴性

,

同时

２

种不同方法相隔

５

察

.

２

同时进

０２１

年

２

月

１

日患者再次来医院检查

,

行咽部和鼻咽部两处采集核酸标本进行检测

(

之江

,

公司试剂

,

批号

P

检测结果均为阴性

.

２０２１０１５３

)

再次进行抗体检测

,

静脉采血测定血清特异性

IM

g

,

和

I

博奥赛斯公司试剂

)

结果

IG

抗体

(

M

同样为

gg

阳性反应

,

再次进行抗体验证实验

IA

阴性

,

总抗

g

准指出

,

无明确流行病学史

,

符合临床表现中任意

２

条

,

同时新型冠状病毒特异性

I

或符合

M

抗体阳性

,

g

临床表现中的

３

条才可确诊

.

此病例只符合

IM

抗

g

体阳性

,

临床表现均不符合

,

最终确诊为假阳性

.

为

了探查假阳性的影响因素

,

对患者血清标本做了一

系列检测旨为寻找

COVIDＧ１９

抗体检测的影响因

素

,

为医生的诊断治疗提供可靠依据

.

体测定阳性反应

.

抗体检测

(

万孚丽珠公司试剂

)

详细结果及判定标准见

IM

和

IG

抗体均阴性

(

gg

).

与临床主管医生联系密切追踪

３

周

,

表

１

患者均

未产生临床相关症状

.

材料和方法

　　１　

新型冠状病毒筛查资料

现定居北京

,

一年前肠镜检

　　

患者为男性

,

６４

岁

,

试剂品牌

万孚

丽珠

２０２１０２０１

和信

博奥

赛斯

２０２１０２０１

２０２１０１２９

实验日期

２０２１０１２９

试剂批号

表

１　

血清特异性

IM

和

IG

抗体两次筛查结果

gg

实验方法抗体类型

IM

g

IM

g

IM

g

IA

g

IG

g

IG

g

IG

g

胶体金层析法

胶体金层析法

胶体金层析法

胶体金层析法

磁微粒化学发光法

磁微粒化学发光法

磁微粒化学发光法

磁微粒化学发光法

磁微粒化学发光法

磁微粒化学发光法

磁微粒化学发光法

磁微粒化学发光法

结果

阴性

阴性

阴性

阴性

４．０７

∗

０．１２６

０．０８１

阳性判断标准

T

线肉眼可见

T

线肉眼可见

T

线肉眼可见

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

/

cutＧoff

值

≥１．０Sco

T

线肉眼可见

２０１１４２０４１０

２０１１４２０４１０

２０１１４２０４１０

２０１１４２０４１０

G２０２０１１００４

G２０２０１１００５

G２０２００７９１２

G２０２００７９１２

G２０２０１１００８

G２０２０１１００５

G２０２００７９１３

G２０２００７９１２

总抗体测定

IM

g

IA

g

IG

g

１１．０１１

∗

４．０７８

∗

０．２０５

０．０９０

总抗体测定

９．７３４

∗

　　　

注

:

∗

阳性

　　２　

入院临床检查

入院体温

３

流

　　２０２１

年

１

月

２９

日就诊消化科

,

６７．℃

,

行病学史调查为无疫区旅行或居住史

、

无感染者接

触史

、

未进行新冠疫苗接种

.

患者一年前肠镜查出

肠息肉要求复查

,

体检未见有皮疹

,

扁桃体无肿大症

状

,

浅表淋巴结未见肿大

,

咽部未有充血症状

,

心率

:

标记免疫分析与临床

　２０２１

年

５

月第

２８

卷第

５

期

７８７

E２００７２９BO

;

RFＧIM

批号

:

E２００９０２AA

;

RFＧIG

批

gg

号

:

酶联免疫吸附法

,

仪器

:

E２００７２４CQ

.

方法

:

EVOLIS

全自动酶免分析仪

.

抗核抗体

)

德国欧蒙医

　　５．３　ANA

(

　

检测试剂

:

间接免疫荧光法

,

仪器

:

OlmusBXＧ５１

荧光显

yp

微镜

.

学实验诊断有限公司

,

批号

:

CF２００９１５AA

.

方法

:

抗核抗体谱

)

德国欧蒙

　　５．４　ENA

(

　

检测试剂

:

医学实验诊断有限公司

,

批号

:

D２００８１４AA

.

方法

:

欧蒙印迹法

,

仪器

:

EUROBLotMasterⅡ

全自动免

疫印迹仪

.

上海科新

　　５．５　

抗环瓜氨酸肽

CCP　

检测试剂

:

生物技术有限公司

,

批号

:

酶联免

EC２０１００２

.

方法

:

疫检测法

,

仪器

:

MultiskanFCthermo

酶标仪

.

北京和杰

　　５．６　

抗核周因子

(

APF

)

　

检测试剂

:

创新生物医学科技有限公司

,

批号

:

２０２００９０１

.

方

法

:

间接免疫荧光法

,

仪器

:

OlmusBXＧ５１

荧光显

yp

微镜

.

　　５．７　

肿瘤影响因素

　

患者一年前肠镜查出肠

息肉

,

当时进行癌胚抗原以及甲胎蛋白检测

,

结果正

常

.

这次入院检查患者无阳性体征

,

没有任何不适

,

否认有过敏史

,

肿瘤疾病

,

彩超无

CT

平扫结果正常

,

合增生性息肉

,

因此排除肿瘤方面的影响因素

.

见表

２

.

　　

影响特异性

IM

和

IG

抗体的因素

,

gg

方法实验结果

６３．８２

＜９．３８

＜２０

＜２０

结果判断

＜２０

＜９．３８

＜２０

＜２０

,

心律齐

,

未及杂音

,

双肺呼吸音清

,

双肺

７０

次

/

min

腹平软

,

无压痛和反跳痛

,

双肾区

CT

平扫结果正常

,

９

/

常

.

白细胞测定值

５．

淋巴细胞绝对值

７×１０

L

,

９

/

肝肾功能正常

,

凝血

２．２４×１０

L

,

C

反应蛋白正常

、

剂

:

欧盟医学实验诊断股份公司

,

RFＧIA

批号

:

g

叩击痛为阴性

,

肠鸣音存在

,

检查神经系统未发现异

四项测定和感染四项测定均正常

.

２０２１

年

２

月

４

日

进行胃镜肠镜检查

,

结肠息肉钳除

.

２０２１

年

２

月

７

日

,

息肉病理结果为黏膜符合增生性息肉

.

　　３　

新型冠状病毒抗体影响因素探查

　　

新型冠状病毒特异性

IM

和

IG

免疫测定假

gg

阳性一般具有以下两方面的原因

,

一个是试剂盒阳

)

性判断值

(

设置

;

再者就是患者标本中

cutＧoffvalue

存在导致免疫测定假阳性的内源性或外源性干扰物

质

.

本文着重对内源性和外源性干扰物进行探索

.

目前我们所知的内源性干扰物质一般包括类风湿因

子

、

补体

、

嗜异性抗体等

.

外源性干扰物质包括溶

血

、

标本被污染

、

储存时间过长和标本凝固

.

　　４　

外源性干扰排除

　　

标本为当日采集

,

３５００５min

高速离

g

离心力

１

心

,

未发生溶血

,

未有标本凝固

,

安全柜中操作

.

　　５　

内源性干扰物排除

补体

C

补体

C　　５．１　

类风湿因子

(

RF

)

IM

、

３

、

４　

g

检测试剂

:

西门子医学诊断产品有限公司

,

RF

试剂

散射比浊法

,

仪器

:

西门子

B

１５３５４３E

.

方法

:

NⅡ

特

定蛋白分析器

.

　　５．２　

类风湿因子

(

RF

)

IM

、

IG

、

IA　

检测试

ggg

项目

类风湿因子

IM

g

类风湿因子

IM

g

类风湿因子

IA

g

补体

C３

补体

C４

类风湿因子

IG

g

简称

批号

:

补体

C

补体

C

５０７８９

,

３

批号

:

１５３３４４D

,

４

批号

:

异常结果

.

２０２１

年

２

月

７

日息肉病理结果为黏膜符

结

　　

果

表

２　

影响特异性

IM

和

IG

抗体的因素

gg

RFＧIM

g

RFＧIM

g

RFＧIA

g

C３

C４

RFＧIG

g

酶联免疫吸附法

散射比浊法

酶联免疫吸附法

酶联免疫吸附法

散射比浊法

散射比浊法

间接免疫荧光法

欧蒙印迹法

酶联免疫检测法

间接免疫荧光法

１．２４

阴性

阴性

０．９~１．８

０．１~０．４

阴性

阴性

＜２５

阴性

０．３１９

抗核抗体

抗核抗体谱

抗环瓜氨酸肽

抗核周因子

ENA

CCP

APF

ANA

＜２５

阴性

　　

本病例新型冠状病毒抗体

IM

和总抗体测定两

g

次均阳性

,

但是二者都不满足持续增高的标准

.

同

时两次

I

据有关科研文献报道血

A

和

IG

为阴性

,

gg

IM

和

IG

的血清学转化时间发生在发病后第

５

gg

清

I

而

A

的血清学转化时间在发病后的第

２

天

,

g

讨

　　

论

IM

的阳性率

９３．４％

,

IG

的阳性率

９５．１％

.

IA

ggg

和

I

在患者发病后的第

２

周出现明显的增长

,

并

G

,

g

[]

持续增高

;

而

IM

持续升高的不明显

７

.

这三个观

g

天

.

检测

１８３

例新冠确诊患者

,

IA

阳性率

９８．９％

,

g

点都说明当

IA

和

IG

都为阴性而只有

IM

为阳

ggg

性几率非常低

.

关键是临床表现均不符合诊断标

７８８

准

,

所以最终确定为假阳性

.

为了寻求假阳性的影

响因素特此做了上述实验

.

结果除了用酶联吸附法

测

RFＧIM

为弱反应性外其余结果均为阴性

.

据有

g

关文献研究

:

核酸阴性

,

IM

弱阳性

、

IG

阴性患者

gg

初次感染载量极低的

２０１９ＧnCoV

并处于早期

,

病毒

载量低于核酸检测下限

,

机体产生少量

IM

,

尚未

g

产生

IG

;

或由于患者自身类风湿因子阳性等引起

g

[]

的

IM

假阳性

６

.

因此初步判断有可能是

RFＧIM

gg

,

LabeledImmunoassas&ClinMedMa．２０２１

,

Vol．２８

,

No．５

yy

在临床诊断中

,

不能单纯地依据抗体血清学结果进

行判读

[

８

]

.

所以建议核酸测定最好联合胶体金法

和化学发光法两种抗体检测方法

.

核酸检测与抗体

检测的联合可提高诊断效率

,

当检测结果出现不一

致情况时

,

一定要综合分析判断再进行结果解读

,

避免误诊

.

也希望通过个案的分析为抗体检测试剂

的进一步完善提供一点有用的信息

.

参考文献

[]

王开利

,

张昕

,

申立军

,

等

．

初筛阴性的新型冠状病毒肺炎患者

１１

[]

中华人民共和国国家卫生健康委员会

．

关于印发新型冠状病毒肺炎

２

２０２０Ｇ０３Ｇ０３．１Ｇ２２．

]():

例

[

传染病信息

,

J．

２０２０

,

３３１７０Ｇ７４．

因子引起新冠抗体

IM

阳性反应

.

为了进一步证实

g

患者抗体

IM

阳性反应可能是类风湿因子引起的

,

g

用散射比浊法重新检测同一管血清

RFＧIM

结果为

g

低于检测线

.

由此可见此患者新冠抗体

IM

阳性也

g

有可能是

RFＧIM

引起的

.

由于本实验室条件限制

g

没能将全部内源性干扰物排除

,

所以本实验室一系

列内源性干扰物实验检测最终没能明确的确定出本

病例影响抗体假阳性的因素

.

　　

本实验室所做的一系列实验虽然没能最终找到

明确的影响因素

,

但通过对本案例抗体假阳性影响

因素的探查

,

提示我们对任何结果可疑患者

,

要结合

其流行病学史

、

临床表现

、

核酸检测

、

抗体

CT

检查

、

检测的结果再确诊

,

以免遗漏无症状感染者

.

当然

新型冠状病毒抗体测定作为核酸辅助筛查方法

,

对

无症状携带者的筛查

、

COVIDＧ１９

流性病学调查研

究以及血浆治疗监测评价等意义很大

.

可是受很多

已知未知因素影响可能出现假阳假阴的结果

.

由于

抗体检测存在窗口期以及检测本身的方法学问题

,

〕

[

]

诊疗方案

(

试行第七版

)

的通知

(

国卫办医函

〔

２０２０１８４

号

)

EB．

[]

徐万洲

,

李娟

,

何晓云

,

等

．

血清

２３０１９

新型冠状病毒

IM

和

IG

抗

gg

]

．

体联合检测在新型冠状病毒感染中染中的诊断价值

[

中华检

J

):

验医学杂志

,

２０２０

,

４３

(

３２３０Ｇ２３３．

[]

中华人民共和国国家卫生健康委员会

．

关于印发新型冠状病毒肺炎

４

２０２０Ｇ０８Ｇ１８．１Ｇ２５．

〕

[

诊疗方案

(

试行第八版

)

的通知

(

国卫办医函

〔

２０２０６８０

号

)

EB

]

．

[]

曹雪涛

．

医学免疫学

．

第

７

版

[

北京

:

人民卫生出版社

,

５

M

]

．

２０１８．

]()

术应用探讨

[

协和医学杂志

,

J．

２０２０

,

１１６

．６４９Ｇ６５３．

[]

宁雅婷

,

侯欣

,

陆旻雅

,

等

．

新型冠状病毒血清特异性抗体检测技

６

[]

YUHQ

,

７

SUNBQ

,

FANGZF

,

etal．Distinctfeaturesof

,():

EurResirJ

２０２０５６２２００１５２６．

p

SARSCoVＧ２ＧsecificIAresonseinCOVIDＧ１９

p

atients

[

J

]

．

pgp

[]

贾兴旺

,

刘青

,

陈泽衍

,

等

．

胶体金法检测血清

２８０１９

新型冠状病毒

]

标记免疫分析

IM

和

IG

抗体的临床应用及干扰因素分析

[

J

gg

():

与临床

,

２０２０

,

２７５８４５Ｇ８４９．

郑

的私人联系方式及信任

.

　　

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